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型号:50T
鹿源性成分(Deer)荧光PCR检测试剂盒
描述:

鹿源性成分(Deer)荧光PCR检测试剂盒用 SB/T 10923-2012 中的鹿源性成分特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,从而达到快速检测之目的。

  • 厂商性质

    生产厂家
  • 更新时间

    2025-06-10
  • 访问量

    90
详细介绍
品牌烜雅生物货号XY-D-0567
规格50T/盒供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
英文名称Diagnostic Kit for Deer derived ingredients DNA保存条件-20℃±5℃,避光保存
有效期12个月

产品简介:

本试剂盒适用于动物组织以及食品、饲料等样本中鹿源性成分的检测。检测结果仅供参考。


产品特点:

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制,确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量,让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化,具有出色的灵敏度,能够检测到极微量的鹿源性成分核酸,不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性,研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析,每一步都有清晰的操作指南,即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证,适用于动物组织以及食品、饲料等多种常见样本,满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务,根据您的特殊需求进行产品优化和调整,为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了鹿源性成分(Deer)荧光PCR检测试剂盒,我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒,满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队,在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持,购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题,让您无后顾之忧。


产品参数:

产品规格

50T/盒,可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR,具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g,转至含 1.5mL 无菌生理盐水的洁净离心管送检。

保存和运输

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃。但不能超过 6 个月,标本运送应采用 0℃冰壶。


使用方法:

1.样品处理(样本处理区)

1.1参照 SN/T2980-2011 标准的提取方法,如下:

1.1.1试剂配置

1)1mol/L Tris-Cl(pH8.0):称取 Tris 121.1g,加入 ddH2O 800mL 溶解,冷却至室温后弄 3M 浓盐酸调 PH 至 8.0,加 ddH2O 定容至 1L,分装灭菌。

2)CTAB 裂解液:800mLddH2O 加入 40.95g NaCl,10g CTAB(十六烷基三甲基溴-化铵);完-全溶解后加入 1mol/L Tris-Cl(pH8.0)50mL,0.5mol/L EDTA

(pH8.0)20mL,磁力搅拌器剧烈搅动拌用氢氧化钠调节 pH 至 8.0,水定容至1L,分装灭菌;

1.1.2DNA 提取

取 100mg 左右样品于 1.5mL 离心管中,加入 600-800μL 预冷的 CTAB 裂解液, 65℃水浴 30min,每隔 10min,振荡混匀一次;100℃沸水浴 5min;12000r/min离心 5min,吸取上清液至一新的离心管中,加 400μL 氯仿+异戊醇混合液(体积比 24:1),充分混匀后 12000r/min 离心 10min,吸取上清液至新的离心管中,加0.8 倍体积的异丙醇,-20℃下沉淀DNA 30min;12000r/min 离心10min,弃去上清液;75%乙醇轻柔地洗涤沉淀一次,12000r/min 离心 8min,弃液体, 晾干;加入 100μL 1xTE,充分溶解沉淀;

1.2核酸稀释(油脂类饲料不必进行此步骤)

提取的 DNA 用紫外分光光度计进行浓度测定,取 5μL 提取好的 DNA,1mL ddH2O,用 ddH2O 做对照,测定 260nm 和 280nm 的吸光度 A260 和 A280,DNA 的浓度 c=A260x10μg/μL(当 A260/A280 比值在 1.7~1.9 之间时,DNA 模版纯度适宜扩增)。

2.试剂配制(试剂准备区)

根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;反应管数每满 10 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:

试剂Deer 反应液酶液

用量20μL1μL

3.加样(样本处理区)

 

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。

4.PCR 扩增(核酸扩增区)

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;

4.2设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25ul;荧光通道选择: 检测通道

(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)NONE,请勿选择ROX 参比荧光。

4.3推荐循环参数设置:

步骤循环数温度时间收集荧光信号

11 cycle95℃10min

240 cycles94℃15sec

55℃30sec

结果分析判定

5.1结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。

5.2判断

a)检测通道 Ct 值≤30,有 FAM 荧光信号检出,并出现典型的扩增曲线,判断样品为阳性。

b)当 30<Ct 值≤35 时,且有典型的扩增曲线时,则需重复实验。再次扩增后检测体系的Ct 值仍≤35,且有典型的扩增曲线,则判定该样品含有相应的动物源性成分。当再次扩增后,检测体系 Ct 值>35,或无典型的扩增曲线,则判定该样品不含相应的动物源性成分。

6.质控标准

a)空白对照:无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35,未出现典型的扩增曲线。

b)阴性对照:无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35,未出现典型的扩增曲线。

c)阳性对照:有 FAM 荧光信号检出,并出现典型的扩增曲线,Ct 值<30。

d)以上应同时满足,否则本次实验无效。

7.检测方法的局限性

7.1样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;

7.2样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;

7.3阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;

7.4病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;

7.5不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;

7.6试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;

7.7本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。


注意事项:

1.所有操作严格按照说明书进行;

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完-全混匀并短暂离心;

3.反应液应避光保存;

4.反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的鹿源性成分(Deer)荧光PCR检测试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!

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