口蹄疫病毒O型/A型(FMDV-O/-A)PCR试剂盒分别对 O 型和 A 型口蹄疫病毒设计特异性引物和探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对 O 型和 A 型口蹄疫病毒 RNA 进行体外扩增检测，用于对可疑感染病料的病原学诊断。

产品简介：

口蹄疫(Foot and mouth disease，FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus，FMDV)感染引起偶蹄动物的一种急性、烈性、接触性传染病。世界动物卫生组织（OIE）将口蹄疫列为必须报告的动物传染病，我国   规定口蹄疫为一类动物疫病。

口蹄疫的传染源主要为潜伏期感染及临床发病动物。易感动物可通过呼吸道、消化道、生殖道和伤口感染病毒，通常以直接或间接接触（飞沫等）方式传播，或通过人或犬、蝇、蝉、等动物媒介。感染动物呼出物、   唾液、粪便、尿液、乳、精液及肉和副产品均可带毒。牛羊等反刍动物感染后，病毒可在食道-咽喉部持续带毒。该病可分为 O、A、C、南非 I 型、南非 II 型、南 III 型和亚洲 I 型等血清型，其中以 O 型和 A 型和亚洲 1 型分布最-广，危害最大。

本试剂盒适用于检测口蹄疫易感动物的水泡液、水泡皮、组织样品、反刍动物 O-P 液样品及血清样品中的O 型和 A 型口蹄疫病毒，适用于 O 型和 A 型口蹄疫病毒感染的辅助诊断。

产品特点：

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制，确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量，让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化，具有出色的灵敏度，能够检测到极微量的口蹄疫病毒O型/A型核酸，不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性，研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证，适用于水泡液、水泡皮、组织样品、反刍动物 O-P 液样品及血清等多种常见样本，满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务，根据您的特殊需求进行产品优化和调整，为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了口蹄疫病毒O型/A型(FMDV-O/-A)PCR试剂盒，我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒，满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队，在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持，购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题，让您无后顾之忧。

产品参数：

产品规格

50T/盒，可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR，具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

水泡液采集：典型临床发病动物水泡液用灭菌注射器吸出后装入样品保存管，加青-霉素 1000 IU/mL、链霉-素 500 IU/ mL，加盖封口，冷冻保存。

其它样品采集参考 GB/T 18935-2018《口蹄疫诊断技术》[1]中（5.3.2 章节）水泡皮样品采集，（5.3.3 章节）组织样品采集、（5.3.4 章节）反刍动物 O-P 液样品采集、（5.3.5 章节）血清样品采集进行规范采集。

保存和运输

采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。

使用方法：

1.样品处理（样品处理区）

1.1样品前处理

水泡液样品：水泡液以 3000 r/ min 离心 10 min，取上清液备用。

水泡皮样品处理，组织样品处理、反刍动物 O-P 液样品处理，血清样品处理参考 GB/T 18935-2018《口蹄疫诊断技术》[1]进行规范处理。

1.2核酸提取

推荐采用公司生产的核酸-提取试剂（离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进    行操作。

2.试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样品总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N（N=样品数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份），每测试反应体系配制如下表：

试剂FMDV-O/-A 反应液酶液

用量19μL1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，20μL/管。

3.加样（样品处理区）

将步骤 1 提取的 RNA、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。

4.PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM、VIC， 淬灭通道（Quencher Dye）选择 NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。

4.3推荐循环参数设置：

步骤循环数温度时间收集荧光信号

11cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.结果分析判定

5.1结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析 ABI7500 仪器为例）

反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用户可根据实际情况自行调整， Start 值可设在 3～ 15、End 值可设在 5～ 20 ， 使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击 Analyze 自动获得分析结果。

5.2结果判断

FAM 通道为口蹄疫 O 型检测结果，VIC 通道为口蹄疫 A 型检测结果阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；

阴性：样品检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。

5.3质控标准

阴性质控品：无特异性扩增曲线或无 Ct 值；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

6.检测方法的局限性

1.样品检测结果与样品收集、处理、运送以及保存质量有关；

2.样品提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

3.阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

4.病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

5.不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

6.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

7.本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。

注意事项：

1.所有操作严格按照说明书进行；

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完-全混匀并短暂离心；

3.反应液应避光保存；

4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的口蹄疫病毒O型/A型(FMDV-O/-A)PCR试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！