棕色固氮菌，斜面、穿刺菌和冻干粉应在 4-10 度保存，甘油菌在-80 度保存。研究；教学；分类；分析检测。

菌种名称：棕色固氮菌

英文名称：Azotobacter vinelandii

培养基 胰蛋白胨：15.0，大豆胨：5.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH：7.3±0.2(25℃) 

生长条件 30℃；18-24h；好氧 

存储条件 2-8℃ 

安全等级 1 

形态 大小：0.5-1mm 形状：圆形 边缘：整齐 透明度：不透明 颜色：淡黄色 隆起度：中间凸起 表面：明亮光滑 质地：湿润易挑起 

模式菌株 no 

操作步骤 ①准备1支含有5~10mL液体培养基或无菌水的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。 

注意事项：

1.微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

2.棕色固氮菌操作在无菌条件下进行，接种完毕应该灭菌再做丢弃处理；

3.斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月，应根据菌种状况及时结转；冻干粉保存时间通常是 2-25 年；甘油菌保存时间为 2-5 年。

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