两歧双歧杆菌，斜面、穿刺菌和冻干粉应在 4-10 度保存，甘油菌在-80 度保存。研究；教学；分类；分析检测。

菌种名称：两歧双歧杆菌

英文名称：Bifidobacterium bifidum

培养基 蛋白胨：15.0，葡萄糖：20.0，酵母浸粉：2.0，可溶性淀粉：0.5，氯化钠：5.0，L-半胱氨-酸：0.5，番茄浸粉：5.0，肝浸粉：2.0，吐温80：1.0ml，琼脂20.0，pH：7.0±0.1(25℃) 

生长条件 37℃；3-4天；厌氧； 

存储条件 2-8℃ 

安全等级 1 

形态 菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘不规则，正面灰白色，中间凸起，表面灰暗，质地干燥，G＋（蓝紫色），杆菌，纯度：纯 

分离基物 婴儿肠道 

模式菌株 no 

操作步骤 ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。 

注意事项：

1.微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

2.两歧双歧杆菌操作在无菌条件下进行，接种完毕应该灭菌再做丢弃处理；

3.斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月，应根据菌种状况及时结转；冻干粉保存时间通常是 2-25 年；甘油菌保存时间为 2-5 年。

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