白色念球菌RNA纯化试剂盒（过柱法）得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 杂交、cDNA 合成等实验。

产品简介：

白色念珠菌（Candidaalbicans），是一种真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起疾病，当机体免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制约作用失调，则本菌大量繁殖并改变生长形式（芽生菌丝相）侵入细胞引起疾病。因此对其进行分子生物学研究具有重要意义。但其 RNA 的提取不是非常容易，所以本公司专门开发了专门用于白色链珠菌总 RNA 快速提取的本试剂盒。

产品特点：

1.操作更加简单快速，整个过程只需要不到十分钟（对一个样品而言）。

2.RNA 纯度更高，OD260/OD280 一般在 2.0 左右。

3.一般不含用 RT-PCR 可以检测到的基因组 DNA 污染。

4.RNA 产率高，一般在 20-70g/mL 白色念珠菌培养物(约 2.0×10E 个细胞)。

5.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 杂交、cDNA 合成等实验。

6.可以进行无氯仿操作，只是纯度稍微降低，但不影响使用。

7.本产品足够 50 次微量提取。

8.白色念球菌RNA纯化试剂盒（过柱法）只能用于科研。

产品参数：

规格及成分

保存和运输

常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂

氯仿，RNase-free 收集管，液氮，球磨仪，超声破碎仪。

使用方法：

1.将 50mg 左右湿重的样品(或 100 mg 左右的菌落)转移到 1.5 mL 塑料离心管中。如果是液体真菌培养物，则直接将 1-10 mL 液体真菌在 1.5 mL 塑料离心管中 15000g 离心 1 分钟，并弃尽液体培养基（可以分多次离心）。

2.将真菌沉淀在液氮中冷凝成固体，再转移到一个干净的研钵中，在液氮中研磨成粉。再把粉转移到到离心管中。最后加入 65℃预热的 0.4 mL 白色念球菌 RNA 纯化溶液 A。

3.也可以采用球磨破碎仪或超声破碎仪在 0.4mL 白色念球菌 RNA 纯化溶液 A 中破碎细胞。

4.加入 0.4 mL 白色念球菌 RNA 纯化溶液 B，剧烈振荡 30 秒。

5.65℃保温 5 分钟。

6.室温 15000g 离心 3 分钟，转移上清到一干净的 1.5mL 塑料离心管中。

7.再加入 0.1 mL 白色念球菌 RNA 纯化溶液 B 和 0.1mL 自备氯仿。此步可以不加氯仿，但纯度稍低。

8.涡旋振荡混匀 30 秒。

9.室温 15000g 离心 3 分钟，转移上清到一自备的、干净的 5mL 塑料离心管中。注意：1.5mL 的离心管装不了后续要加的溶液。

10.加入 1.5 mL 的白色念球菌 RNA 纯化溶液 C（约 1.2-1.5 mL）和 0.5 mL 的白色念球菌 RNA 纯化溶液 D，充分颠倒混匀。

11.将 0.7 mL 混合液转移到离心吸附柱中，15000g 室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。重复此操作直到将所有混合液挂柱。

12.加入 0.5 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。

13.重复上步洗涤一次。

14.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的使用。

15.将离心吸附柱转移到一自备的 RNase-free 1.5mL 塑料离心管中，加入 30-100L RNA 洗脱液。

16.室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

选择我们的白色念球菌RNA纯化试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！