琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒（过柱法），高效，回收效率-最高可达90%（跟片段大小和胶浓度等因素有关）。

产品简介：

琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒（过柱法）用于从琼脂糖凝胶中或DNA反应体系中高效快速回收DNA片段。

产品特点：

1.高效，回收效率-最-高可达90%（跟片段大小和胶浓度等因素有关）。

2.快速，整个过程只需要十余分钟。

3.洗柱液不需要额外加乙醇。

4.两用，既可用于琼脂糖胶回收，也可以用于PCR或其他酶反应回收。

5.范围广，回收DNA的长度范围为50 bp-40 Kb（但效率各不相同）。

6.最大吸附量为10ug。

7.回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR、测序等多种分子生物学实验。

8.本试剂盒足够纯化50片含DNA的琼脂糖凝胶条（每片胶条重量不超过250mg），足够纯化50次酶反应（包括PCR反应，每次体积不超过250uL）。

产品参数：

规格及成分

保存和运输

常温运输及保存，有效期为一年。由于通用溶胶液是高盐溶液，因此在低温时容易产生沉淀。如果产生沉淀，需要 60℃加热溶解后才可以使用。

自备试剂

异丙醇。

使用方法：

1.用自备的干净刀片切取含 DNA 片段的琼脂糖凝胶（100 mg 左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率），放入一干净的 1.5 mL 塑料离心管中称重，按重量比为 1：2 的比例加入通用溶胶液 (0.1 g 的琼脂糖凝胶需要加入 0.2mL 的通用溶胶液)。如果琼脂糖凝胶的浓度大于 2%，则需要按 1：3 的比例加入通用溶胶液。

2.50℃保温 10 分钟使胶完-全溶化，每隔 2-3 分钟振荡数次以促进琼脂糖凝胶的溶化。如果片段长度在 300bp 以下，建议不要 50℃保温，而是延长溶胶时间，以免 DNA 变性，影响回收率。

3.在等待期间，活化离心吸附柱。在离心吸附柱中加入 0.5mL 吸附柱活化液，套上收集管后室温放置 2 分钟，然后 12,000 rpm 离心 2 分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须在当天使用。

4.在上柱前，在溶化的胶中加入相当于胶块体积 1/2 的异丙醇（对 100mg 胶块， 加 50uL），快速振荡 10 秒混匀。

5.将溶液转移到离心吸附柱中，套上收集管，静置 3 分钟。注意：静置有助于DNA 与离心吸附柱的硅胶膜结合。本产品提供的离心吸附柱的最大上样体积为 0.8mL，若溶胶液的总体积大于 0.8mL，一次加不完，可以分多次将溶液加入到吸附柱中。

6.12000-15000 g 室温离心 1 分钟，倒掉收集管中的穿透液。

7.加入 0.7mL 通用洗柱液于离心柱中，12000-15000 g 离心 1 分钟，倒弃收集管中的废液。如果回收的 DNA 用于盐敏感实验（如平末端连接或直接测序）,建议加入通用洗柱液后静置 2-5 分钟再离心。

8.12000-15000 g 离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。

9.将离心柱吸附置于一新的干净的塑料离心管中，加入 50 uL DNA 洗脱液于离心吸附柱硅胶膜的中央。注意：如果回收的 DNA 用于测序，则可用重蒸水洗脱DNA。DNA 洗脱液可以也用 TE 替代，但用水或 TE 替代 DNA 洗脱液时，回收率可能稍有降低。

10.  静置 3 分钟后 12000-15000 g 离心 1 分钟。

11.离心管底部所得溶液即为纯化的 DNA 溶液，可立即用于后续实验或者放-20℃ 长期保存。如果将所得 DNA 溶液再次加回到离心吸附柱中，重复洗脱过程， 将得到更多的 DNA。

12.用电泳方法或测 OD 方法确定回收所得 DNA 的浓度。如果 DNA 浓度低，也可能低于测 OD 的分光光度计的检测极限之下，此种情况下就不能用此法。

注意事项：

1.通用洗柱液含有容易挥发物质，使用后一定要拧紧瓶盖，密闭保存。

2.琼脂糖凝胶体积的大小与回收率成反比关系，即体积越大，越不利于回收，一  次胶回收以使用 100 mg 琼脂糖凝胶为宜。

3.如果在 5-10 分钟内凝胶溶化不完-全，可以适当的延长水浴时间以使胶充分溶化，否则 DNA 包裹在琼脂糖凝胶中，影响 DNA 的回收效率。

4.胶溶化后的液体转移到离心柱后，可以延长静置时间使 DNA 与膜充分结合， 提高回收效率。

5.洗脱 DNA 前的空甩很重要，其目的是去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续 DNA 反应。

6.增大 DNA 洗脱液使用量有利于回收，但要注意实际上样量与最终回收体积的关系，以便于计算回收率。DNA 洗脱液可以用 TE 或水替代，但回收率稍有降低。

选择我们的琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！