病毒RNA-提取试剂盒（过柱法）操作简单快捷，整个过程只需要 30 分钟左右。本产品只能用于科研。

产品简介：

本产品专门用于从血清(血浆或脑脊液)、病毒拭子保存液、培养基等液 体样品中提取微量病毒 RNA 的产品。

产品特点：

1.操作简单快捷，整个过程只需要 30 分钟左右。

2.灵敏度高，通过 RT-PCR 检测到的灵敏度最高可以达到 50 拷贝/mL

（根 PCR 条件相关）。

3.安全无毒，不需要使用苯-酚和氯仿等有机溶液。

4.一般一次可以处理 0.2 mL 样品。如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理 1.5 mL 样品。

5.得到的 RNA 可以用于后续的 RT-PCR 和荧光定量 RT-PCR。

6.价廉物美，性价比远低于国外同类产品。

7.适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞  上清液等无细胞材料。

8.病毒RNA-提取试剂盒（过柱法）只能用于科研。

产品参数：

产品规格

成份包装包装

病毒裂解液30 mL30mL 本色瓶

核酸挂柱液40 mL60mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60mL 本色瓶

RNA 洗脱液10 mL10mL 本色瓶

使用手册1 份无

保存和运输

常温运输和保存，RNA 病毒裂解液长期（1 周）放置需放 4℃，有效期一年。

自备试剂

无

使用方法：

1.如果有 N 个样品，标记 N+2 个 1.5-2 mL 螺旋盖塑料离心管，多出的一个为阳性对照，一个为阴性对照。为避免污染，建议不要使用压盖  式塑料离心管。在做标记时，最好标出向心面或离心面，以便在后续  离心后取上清时 不会把沉淀丢失。

2.各加入 0.2 mL 液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等）。

2.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入 0.2mL 自备生理盐水中挤压出液体，然后取 0.2 mL 进行提取。

2.2、 如果是粪便等半固定样品，则取约 0.3 mL 的样品，加入 0,3自备生理盐水，震荡重悬，离心取 0.2 mL 上清进行提取。

2.3、 如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直接取用，但后者提取的 RNA 中有细胞的基因组 DNA 污染。血浆的抗凝剂必须是 EDTA 或 ACD，不能是肝素。使用ACD 时由于所加入 ACD 会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用 EDTA 低 15%左右。血浆最好按 0.6 mL/ 管的量分装保存，以避免反复冻融。

2.4、 如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心，用 0.2 mL 上清液（含病毒）进行提取，但此种情况下最后得到的 RNA 不可避免的会含有基因组 DNA 污染。

2.5、 如果是病毒样品保存液或病毒-采样管，则直接取用 0.2 mL 保存液。

2.6、 如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液体在 4℃ 24,000×g 冷冻离心 60 分钟, 移弃 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL 继续操作。

3.加入 0.6 mL 病毒裂解液，振荡 30 秒混匀。注意：病毒裂解液在 4℃ 放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻-底溶解并充分摇匀后再取用。

4.室温放置 10 分钟。

5.加入 0.8 mL 核酸挂柱液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液

（0.8 mL）到离心吸附柱中。

6.室温放置 2 分钟后 12,000×g 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液， 把离心吸附柱放回到收集管中。

7.将剩余的另外一半裂解液（0.8 mL）转移到离心吸附柱中。

8.室温放置 2 分钟后 12,000×g 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液， 把离心吸附柱放回到收集管中。

9.加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000×g 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。

10.加入 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000×g 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此步为第二次洗涤，可以跳过。

11.12000×g 室温离心半分钟，去掉离心吸附柱中残留的液体。

12.在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-50 μL RNA 洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的 1.5 mL 离心管中.

13.室温放置 2 分钟后 12,000×g 室温离心 1 分钟，离心管中收集的样品即为 RNA。

14.RNA 样品可以直接用于 RT-PCR 或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。

选择我们的病毒RNA-提取试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！