真菌 DNA-提取试剂盒(过柱法) 本方法提取一个样品只需要 30 分钟，方便、快速和高效。

产品简介：

本产品是真菌基因组 DNA 柱式提取试剂盒，可以用于真菌基因组 DNA 的快速提取。真菌 DNA 提取是一个难题，一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完-全不同的结构形态，二是因为其细胞壁一般都很厚，比较难以破碎。本产品专门用于从真菌孢子和液体培养的真菌细胞中提取 DNA。

产品特点：

1.即开即用，提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。

2.既可以采取液氮研磨法破裂真菌，也可用玻璃珠法破碎真菌，两种方法均属于物理方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外援真菌 DNA（注：文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌 DNA 污染，用于提取真菌 DNA 往往会造成污染）。

3.本方法提取一个样品只需要 30 分钟，方便、快速和高效。

4.一次可以处理 5 mL 的过夜真菌培养物，所得的基因组 DNA OD260/OD280 一般都在 1.8 左右，长度一般在 20 kb 左右，每毫升菌液的 DNA 产率一般在 1-3 μg。可以直接用于PCR 和酶切等后续试验。

5.不会发生离心柱堵塞现象。

6.本产品足够 50 次微量纯化。

7.真菌 DNA-提取试剂盒(过柱法) 只能用于科研。

产品参数：

产品规格

成分规格包装

真菌 DNA 提取溶液 A25 mL30 mL本色瓶

真菌 DNA 提取溶液 B25 mL30 mL棕玻瓶

真菌 DNA 提取溶液 C75 mL125 mL本色瓶

离心吸附柱50套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL本色瓶

DNA 洗脱液（基因组纯化专用）10 mL10 mL 本色瓶

酸洗玻璃珠(直径 400 μm-600 μm)25 g30 mL 本色瓶

使用手册1份无

保存和运输

常温运输及保存，保存期为一年。

自备试剂

无菌水。

使用方法：

1.收集菌体或孢子:

1.1、 对菌液：取 3-5 mL 过夜培养的真菌菌液(OD600 一般在 1 以上)到干净的塑料离心管中，12000 × g 离心 2 分钟弃上清留菌体沉淀。

1.2、 对菌落：用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落（约 50 mg）， 转移到装有 1 mL 自备无菌水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的

菌体。12000 × g 离心 2 分钟弃上清留菌体沉淀。

1.3、 对孢子材料，一般取 0.1 g 左右，直接加入到塑料离心管中，然后进入下一步操作。

2.在上述真菌材料中加入自备的无菌水 1 mL，振荡半分钟后 12000 × g 离心 2

分钟弃上清留菌体沉淀。此步用于洗涤菌体。

3.裂解真菌：

3.1、 液氮研磨：在研钵中液氮研磨上述真菌材料成粉，然后转移到干净的离心管中，在离心管中加入 500 μL 真菌 DNA 提取溶液 A，常温涡旋震荡 3分钟。

3.2、 玻璃珠破碎法：在没有液氮的条件下，采用此法。在菌体沉淀中加入 500

μL 真菌DNA 提取溶液A 和 0.5 克的酸洗玻璃珠，常温涡旋震荡 10 分钟。

4.在离心管中加入 500 μL 真菌 DNA 提取溶液 B，涡旋震荡 3 分钟，12000 × g离心 2 分钟，将透明的上清液全部转移到一个 5 mL 的干净的塑料离心管中。不要取下层的液体。

5.在上清中加入 3 倍体积的真菌 DNA 提取溶液 C，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后均先室温放置 2 分钟，然后 12000 × g 离心 1 分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面的操作，直到挂柱步骤完成。

6.在离心吸附柱中加入 500 μL 通用洗柱液，12000 × g 离心 1 分钟，倒掉穿透液。此步可以洗涤掉杂质。

7.重复上步操作一次。

8.12000 × g 空柱离心 1 分钟。

9.加入 50-100 μL DNA 洗脱液（基因组提取专用），室温放置 1 分钟以上，12000

× g 离心 1 分钟，穿透液即为真菌 DNA 样品。

10.为了得到更多的 DNA 样品，可以重复上步操作 1-2 次。

11.所得 DNA 即可立即使用或放冰箱长期保存。

选择我们的真菌 DNA-提取试剂盒(过柱法) ，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！