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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1688 |
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规格 | 5次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | T7 in vitro Transcription and Capping Kit | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
本试剂盒是基于T7 RNA 聚合酶的 RNA 体外转录及加帽试剂盒,它利用含有 T7 启动子的模版 DNA,以 NTP 和m7G(5' )ppp(5' )G 为底物,从 T7 启动子下游开始合成与模版 DNA 中一条链互补的 RNA,简单快速获得大量的 RNA 分子,其中部分 5 端含有帽结构。
产品特点:
1.即开即用,用户只需提供含 T7 启动子的 DNA 模板即可以进行体外转录实验, 不需要单独准备每一个成份。
2.体外转录和加帽同管一步式进行,不需要先体外转录再加帽。
3.单溶液预配液,减少加样次数,避免了操作误差,增加了可重复性。
4.模版 DNA 可以是线性化的质粒 DNA,也可以是 PCR 扩增产物。
5.可以合成的 RNA 的最佳长度在 20 nt 到 2000 nt 之间。
6.产品配方经过精心优化,每μg DNA 模版可以合成 2-6 μg RNA。
7.得到的加帽 RNA 比不加帽的 RNA 更稳定,可以用于 RNA 结构研究、核酶生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX 技术和 RNA 干扰(RNAi)等实验。
8.本试剂盒足够 5 次 20 μL 体系的体外转录实验,并且只能用于科研。
产品参数:
产品规格
成份规格包装
2×T7 体外转录及加帽预配液50 μL0.5 mL 本色盖
T7 RNA 聚合酶-RI 混合液5 μL0.5 mL 黄盖管
RNase-free 水100 μL1.5 mL 蓝盖管
使用手册1 份无
保存和运输
T7 体外转录及加帽试剂盒低温运输,-20℃保存、有效期一年。
自备试剂
Tris 饱和酚、氯仿、RNase-free 75%乙醇(均可从本公司另购)
疑难解答:
1、没有 RNA 产物。最常见原因是模板有 RNase 污染,可用纯化好的 RNA 跟模板 DNA 一起保温再电泳,再检测其是否有污染。
2、RNA 产量低。最常见的原因是 DNA 模板。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是 G,在前 14 个碱基内避免有 U 存在。
3、RNA 长度比预期的短。可能是模板序列中有T7 RNA 聚合酶的终止序列。可以改用 SP6 体外转录试剂盒(启动子也必须改成 SP6 启动子)。
4、RNA 长度比预计的长。T7 RNA 聚合酶跟Taq DNA 聚合酶一样,有不依赖于模板的加尾功能,最多有一半的 RNA 可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA 长度比预计的长很多,模板又是质粒 DNA,则可能是质粒线性化不彻-底。
5、5’单磷酸还是三磷酸。如果使用 GTP,则得到的 RNA 是三磷酸,体外转录时如果保温时间太长(如 12 小时),则有 50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入 GMP,则 T7 RNA 聚合酶将优先使用 GMP,所得 RNA
产物中 5’端是单磷酸的比例将大大增加。
选择我们的T7 体外转录及加帽试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!