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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1717 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
产品简介:
本产品主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组 DNA。
产品特点:
1.DNA 更加纯净,大多数 DNA 样品的 OD260/280 值在 1.8-1.9 之间。
2.DNA 产率一般在 200 g/g 左右(跟组织种类密切相关)。
3.可直接用于 PCR、酶切、杂交等后续反应。
4.操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约 10 分钟, 适合大规模样品处理。
5.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
7.动物DNA纯化试剂盒(过柱法)只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
动物 DNA 纯化溶液 A40 mL60 mL 本色瓶
动物 DNA 纯化溶液 B20 mL30 mL 本色瓶
动物 DNA 纯化溶液 C50 mL60 mL 本色瓶
离心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
DNA 洗脱液
(基因组纯化专用)10 mL10 mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
常温运输和保存、有效期一年。
自备试剂
氯仿(也可省略,但产量会降低)
使用方法:
注意:动物 DNA 纯化溶液 A 容易产生沉淀,动物 DNA 纯化溶液 B 十分粘稠,用前均需要在 65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 根据使用材料的不同进行下列操作:
a) 对贴壁细胞:吸尽培养液,在每 10 平方厘米细胞中加入 0.8 mL 预热的动物DNA 纯化溶液 A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5 mL 塑料离心管中。
b) 对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每 1-5×106 悬浮细胞中加入 0.8 mL预热的动物 DNA 纯化溶液 A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。如果是 fibroblasts 或 carcinoma 细胞,
0.8 mL 动物 DNA 纯化溶液 A 的细胞使用量不要超过 1×106 个细胞。
c)对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入 10 mL 或 15 mL 塑料离心管中,每 50-100 mg 组织加 0.8 mL 预热的动物 DNA 纯化溶液 A,用剪切式匀浆器匀浆 30 秒左右,然后把裂解液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的 DNA),建议组织的使用量不要超过 50 mg。
d)对非冻型 DNA 保存液保存的组织:先用纸吸去保存液后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2.加入 0.4 mL 预热的动物 DNA 纯化溶液 B 到裂解液中。由于动物 DNA 纯化溶液 B 十分粘稠,可将 1mL 枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加 0.4 g。加入动物 DNA 纯化溶液 B 后需要颠倒数次充分混匀。
3.65℃水浴 5-10 分钟。如果室温放置,DNA 产量将降低 10-20%。
4.加入 0.2 mL 自备氯仿,振荡器上充分振荡混均 30 秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5.12000-15000×g 室温离心 2 分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
7.每个管中加入 1.5 倍体积的动物 DNA 纯化溶液 C,充分颠倒混匀。
8.分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟, 12000-15000×g 室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟,12000-15000×g 室温离心半分钟,弃穿透液)。
9.加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000×g 室温离心半分钟, 弃穿透液。
10.加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000×g 室温离心半分钟, 弃穿透液。
11.12000-15000×g 室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染 DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13.将离心吸附柱转移到一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 50-100 L DNA 洗脱液(基因组 DNA 专用),室温放置离心吸附柱 1-2 分钟。
14.12000-15000×g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 DNA 样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
选择我们的动物DNA纯化试剂盒(过柱法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!