藻类RNA-提取试剂盒（过柱法）操作更加简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。本产品仅供科研。

产品简介：

本产品是专门针对藻类 RNA 提取开发的高效 RNA 提取试剂盒。

产品特点：

1.操作更加简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。

2.RNA 纯度更高，OD260/OD280 比值一般都在 2.0 左右，能够有效去除大多数藻类中的多糖污染。

3.适用于常见的各种海水和淡水藻类的 RNA 提取。

4.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、Northern 杂交、cDNA 合成等实验。

5.性价比高于进口的柱式藻类 RNA 提取产品。

产品参数：

成 份规格包装材料

藻类 RNA 提取溶液 A50 mL60 mL 本色瓶

藻类 RNA 提取溶液 B15 mL15 mL 棕色玻璃瓶

藻类 RNA 提取溶液 C50 mL60 mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

RNA 洗脱液10 mL10 mL 本色瓶

使用手册1 份1 份

运输及保存

藻类RNA-提取试剂盒（过柱法）常温运输和保存，溶液 B 需要 4℃保存，有效期一年。

自备试剂

氯仿。

使用方法：

1.估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要 100-200 mg 藻类（湿重）。注意海水藻类需要用纯净水洗涤 2 次以免藻类沉淀中残留的海水盐分干扰藻类 RNA 提取溶液 A 的作用。

2.液氮研磨破碎样品：取 100-200 mg 离心得到的新鲜藻类细胞沉淀放入含液氮的研钵中，迅速将其研磨成粉末后，将粉末转移到标记的塑料离心管中，加入 1 mL 藻类 RNA 提取溶液 A，立即剧烈振荡 20 秒，充分混匀。

注意：藻类 RNA 提取溶液 A 在 4℃放置后容易产生沉淀，使用前必须放在 65℃

水浴使沉淀彻-底溶解并充分摇匀后再取用。

3.将液氮研磨物转移至干净的 1.5 mL 塑料离心管中。

4.在离心管中加入 0.3 mL 的藻类 RNA 提取溶液 B 和 0.2 mL 自备氯仿，在振荡器上振荡 30 秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状（颜色将根据提取的藻类不同而不同）。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。

5.室温 12,000-15,000×g 离心 3-5 分钟，两相间将有细胞破碎物。

6.将上清液(约 0.6 mL)转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中，下层有机相和中间层含有 DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下 100 μL 上清液不取。

7.加入等体积的藻类 RNA 提取溶液 C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生（对某些含糖量高的藻类，属于正常现象），千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。

8.先将一半的溶液（如果有沉淀，则将一半的悬浊液）转移到离心吸附柱中， 13,000-15,000×g 室温离心半分钟，弃穿透液。

9.将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，13,000-15,000×g 室温离心半分钟，弃穿透液。

10.加 0.7 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加 0.3 mL 通用洗柱液， 室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但如果在第 7 步加入藻类 RNA 提取溶液 C 后有沉淀产生，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量改为 0.4、0.3 和 0.3 mL。

11.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响 RNA 的使用。

12.将离心吸附柱转移到 RNase-free 收集管中，加入 50-100 μL RNA 洗脱液，室温放置 1-2 分钟。

13.13,000-15,000×g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

14.RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子。如果电泳发现DNA 污染严重建议减少起始样本的用量，已经纯化好的 RNA 可另购RNase-free DNase 去除 DNA 污染。

15.RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH 7.5-8.2 之间)检测其在 OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA 浓度（1 OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度×体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。

16.RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有

蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。

选择我们的藻类RNA-提取试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！