DNA 尿素-PAGE变性电泳试剂盒一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。

产品简介：

本产品是专门用于DNA 尿素-PAGE 变性电泳的试剂盒。

产品特点：

1.一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。

2.安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙烯酰胺。

3.可用于 DNA 测序、AFLP、DDRT、TGGE 和 RNase 保护实验等。

4.电泳后可直接用于银染、EB 染色等实验。

5.本产品足够 30 次 mini 尿素-PAGE 胶（10 cm×10 cm）实验。

6.DNA 尿素-PAGE变性电泳试剂盒只能用于科研。

产品参数：

成份 规格包装材料

尿素 105 g×2250 mL 本色瓶

丙烯酰胺：甲叉双丙烯酰胺

（29:1），电泳级 62 g250 mL 棕色瓶

TBE 电泳液，10× 250 mL250 mL 本色瓶

TEMED 1.5 mL2.0 mL 白盖管

过硫酸铵 1 g2.0 mL 绿盖管

使用手册 1 份1 份

成份 规格包装材料

2×尿素-PAGE 变性胶上样液 1.5 mL2.0 mL 红盖管

运输及保存

常温运输，保存条件见上表，有效期一年。

自备试剂

去离子水

使用方法：

一、PAGE 浓度和交联度的选择指南

1.尿素-PAGE 变性胶一般使用 29：1（丙烯酰胺：甲叉双丙烯酰胺）的交联度，在此交联度的条件下，DNA 片段长度和最适 PAGE 浓度对应关系如下：

二、制备尿素-PAGE 变性胶此处以配制 100 mL 尿素-PAGE 变性胶为例，如果配制体积不同，则各成分用量需要按比例调整。

2.新鲜配制 10%的 APS（过硫酸铵）：按每 0.1 克过硫酸铵干粉加 1 mL 去离子水的比例将水加到装有硫酸铵干粉的 1.5 mL EP 管中，摇晃到粉末全部溶解。配制好的 10%的 APS 溶液可以在 4℃存放一周，超过一周必须弃之不用。

3.配制 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液（29：1，简称 AB 溶液，下同）：在装有丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺干粉的 250 mL 棕色塑料瓶中加入120 mL 自备的去离子水，颠倒摇晃溶解后，即得 40%的 AB 溶液。注意：丙烯酰胺单体溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。

4.配尿素-PAGE 变性胶：在一个干净的 250 mL 玻璃三角瓶中，按下表的用量加入各成分。注意：丙烯酰胺单体溶液具有神经毒性，一定要戴手套  操作。

5.搅拌直到所有成分溶解，然后用滤纸过滤。

6.抽真空 10-15 分钟以去除溶液中的氧气，因为氧气能抑制丙烯酰胺聚合反应。无条件抽真空也可以跳过此步。

7.加入 500 μL 10%APS 和 100 μL TEMED 后，迅速摇匀后灌胶。

8.在 PAGE 胶的液面距离达到顶部时停止灌胶，插入梳子。

9.室温聚合 30-60 分钟。不能放低温，低温会抑制聚合反应。

10.拔出梳子，用 0.5×TEB 液冲洗加样孔。三、DNA 样品的准备

11.对一般样品、测序样品、微卫星 DNA、AFLP 样品、DDRT 样品、RPA样品：将样品跟 2×尿素-PAGE 上样液 1:1 混合，95℃ 3 分钟变性，然后放冰上待用。

12.对 TGGE 样品：可以不加上样液直接放冰上待用。四：电泳

13.将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽中加入足够 0.5×TEB 电泳液。

14.预电泳 30 分钟，使得 PAGE 胶发热后，将冰上放置的样品上样。

15.连接电源线，打开电源开关。根据胶的大小选择固定功率进行电泳。固定  功率等于固定产热，这样就不容易发生过热而发生 PAGE 胶板破裂的现象。如果固定电流或电压，产热将随电泳时间而变化，不好控制。对小胶一般用 5-6W 的固定功率，大胶用 15-25W 的固定功率。

16.终止电泳，取出凝胶进行后续的处理（如银染）。注意：如果银染，必须延长固定时间以便让洗出尿素，否则胶中残留的尿素会严重干扰后面的银染。

选择我们的DNA 尿素-PAGE变性电泳试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！