粪便DNA纯化试剂盒（过柱法）每次微量提取可以处理 100-300mg 左右的样品，能得到 5 ug 左右 DNA，片段长度在 25 Kb 左右。

产品简介：

本产品专门用于从各种动物粪便中快速提取高质量的 DNA。

产品特点：

1.操作简单快速，一个样品只需要十多分钟的时间。

2.DNA 更加纯净，OD260/280 一般都在 1.8 以上，得到的 DNA 样品原液或稀释液可以直接用于 PCR 扩增。

3.每次微量提取可以处理 100-300mg 左右的样品，能得到 5 ug 左右 DNA，片段长度在 25 Kb 左右。

4.可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的 DNA。

5.试剂无毒无害, 环保。

6.本产品足够 50 次微量粪便 DNA 提取。

7.粪便DNA纯化试剂盒（过柱法）只能科研使用。

产品参数：

成份规格包装材料

粪便 DNA 纯化溶液 A25 mL30 mL 本色瓶

粪便 DNA 纯化溶液 B25 mL30 mL 本色瓶

专用上注液40 mL60 mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脱液（基因组纯化用）10 mL10 mL 本色瓶

使用手册1 份无

运输及保存

常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂

氯仿。

使用方法：

1.65℃预热粪便 DNA 纯化溶液 A，待其沉淀溶化后充分混匀，取 0.5 mL 加入到 1.5 mL 塑料离心管中并放置于 65℃待用。

2.称取 0.1-0.3 g 的粪便，加入到含预热的粪便 DNA 纯化溶液 A 的离心管中， 震荡器上剧烈震荡 5-10 分钟。如果是扩量操作，可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处理，然后再分到 1.5 mL 离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的粪便震荡起来。  注：保存液种类繁多，如粪便如保存在各种保存液中，需自行尝试效果。

3.将离心管置于 65℃水浴中保温至少 5 分钟。

4.14000 g 室温离心 3 分钟，将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际颜色随样品而异，上清液的体积一般为 300-400 µL)。

5.在上清液中加入等体积的粪便 DNA 纯化溶液 B，上下颠倒 30 秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。

6.将离心管冰浴至少 5 分钟。

7.14000 g 室温离心 3 分钟，转移上清到新的 1.5 mL 离心管中，上清液颜色将比第 4 步得到的上清的颜色稍淡，体积在 0.7 mL 左右。

注意：下面第 8 和第 9 步的氯仿抽提操作可以省略，直接进入第 10 步，但 DNA

的产量会低 50%左右，OD260/280 在 1.7-1.8。如果直接进入第 10 步，则转移的溶液体积不要超过 0.6 mL，否则没有空间加专用上注液。

8.加入 0.2 mL 的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡 30 秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。

9.14000 g 室温离心 3 分钟，小心转移上清到新离心管中。说明：离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。将 0.5 mL 上清转移到新的 1.5 mL 离心管中。如果有多余的可以弃之不用。

10.加入 0.8 mL 的专用上注液，上下颠倒 30 秒混匀。

11.分两次上柱（即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液）。

12.加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。

13.再加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的 DNA 的纯度稍有提高，但产量稍微有所降低。

14.14000g 室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。

15.将离心吸附柱转移到一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 100 uL DNA 洗脱液

（基因组纯化专用）。

16.室温放置离心吸附柱 1-2 分钟。

17.14000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 DNA 样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

选择我们的粪便DNA纯化试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！