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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1818 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | / | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 1年 |
产品简介:
本产品利用 Taq DNA polymerase 的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有 dATP 存在的情况下,在平末端的 DNA 片段加上一个 dA 尾巴,使平末端片段也能被 T 载体克隆。
产品特点:
1.简单,2×加 A MasterMix 中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的 DNA 片段,包括 Pfu DNA polymerase 等酶合成的 DNA 片段。
3.产物可以直接用于与 T 载体的连接。
4.本产品足够 50 次加 A 反应。
5.DNA 片段加 A 试剂盒只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
2×加 A MasterMix1 mL2mL 本色管
使用手册1 份无
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂
PCR 片段、超纯水
使用方法:
一:反应前纯化处理:
用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶扩增得到的 DNA 片段,必须经过彻-底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯仿抽提或 Proteinase K 处理),否则它们将在加 A 反应时,切除掉加上的 A 尾巴,干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE 中,终浓度以 0.1 ug/uL 为宜。
二:加 A 反应
在干净的 0.5 mL 或 1.5 mL 离心管中,分别加入回收的 DNA 片段(0.2-2 ug),25 uL 2×加 A MasterMix,补水到 50 uL 后 72℃保温 2 小时
三:反应后处理
加 A 反应后,Taq DNA polymerase 将与 DNA 末端紧密结合,所以必须酚/氯仿抽提去除。如果使用 Proteinase K 处理后再用酚/氯仿抽提效果会更好。得到的 DNA 溶于适量水和 TE 中后即可用于 T 载体的连接反应。
选择我们的DNA 片段加 A 试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!