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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1862 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | Oligo and Primer Recovery Kit | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 1年 |
产品简介:
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离 Oligo 和引物最主要的方法,但是市场上没有专门的产品用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收 Oligo 片段,为此本公司开发的本产品。
产品特点:
1.可以回收 15-50 nt 范围内的各种长度的单链或双链 DNA,长于 50nt 的 DNA 可以使用性价比更高的 DNA 片段回收试剂盒回收。
2.回收率高达 80%以上。
3.一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
4.扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
5.也可以用于 Oligo 酶反应(如磷酸化和去磷酸化反应)后的去盐、脱盐和纯化。
6.本产品足够 50 次微量回收。
7.Oligo和引物回收试剂盒只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
Oligo 和引物回收溶液 A15 mL15mL 本色瓶
Oligo 和引物回收溶液 B15 mL15mL 本色瓶
Oligo 和引物回收溶液 C15 mL15mL 本色瓶
Oligo 和引物回收溶液 D50 mL50mL 本色瓶
离心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL50mL 本色瓶
DNA 洗脱液(胶回收用)10 mL10mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂
PAGE 胶
使用方法:
一:回收 PAGE 胶中的 Oligo
1.切取含 OLIGO 片段的PAGE 凝胶(100 mg 左右,尽可能多地把多余的胶切除, 否则会影响回收效率),放入 1.5 mL 离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2.按重量比为 1:2 的比例加入 Oligo 和引物回收溶液 A(100 mg PAGE 凝胶需要加
入 200 uL Oligo 和引物回收溶液 A)。
3.将离心管水平放置并室温摇晃 1-3 个小时以让 Oligo 从 PAGE 凝胶中扩散出来。
4.12000-15000 g 室温离心 2 分钟,将含 Oligo 的上清液转移到新的离心管中。
5.再用 100 uL 的 Oligo 和引物回收溶液 A 洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6.在上步得到的溶液中加入 300 uL Oligo 和引物回收溶液 B、300 uL Oligo 和引物回收溶液 C 和 750 uL Oligo 和引物回收溶液 D,充分混合均匀后分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置 3 分钟,然后再 12000-15000 g 离心1 分钟,倒掉收集管中的穿透液。
7.加入 600-800 uL 通用洗柱液于离心吸附柱中。
8.12000-15000 g 离心 1 分钟,倒弃收集管中的废液。
9.12000-15000 g 离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10.将离心吸附柱置于一自备的 1.5mL 塑料离心管中,加入 25-50 uL 通用洗脱液,静置 3 分钟。
11.12000-15000 g 离心 1 分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的 Oligo 溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
12.可以PAGE 电泳检查回收效-率,最好使用超高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约
OLIGO 样品的用量。
二:回收溶液中的 Oligo 和引物
1.在含 OLIGO 的、体积不超过 100uL 的反应液中,加入 300 uL Oligo 和引物回收溶液 A, 混合均匀。
2.再加入 300 uL Oligo 和引物回收溶液 B、300 uL Oligo 和引物回收溶液C 和 750 uL Oligo 和引物回收溶液 D,充分混合均匀后分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置 3 分钟,然后再 12000-15000 g 离心 1 分钟,倒掉收集管中的穿透液。
3.加入 500 uL 通用洗柱液于离心吸附柱中,12000-15000 g 离心 1 分钟,倒弃收
集管中的废液。如果有必要,可以重复洗涤步骤一次。
4.12000-15000 g 离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
5.将离心吸附柱置于一自备的 1.5mL 塑料离心管中,加入 25-50 uL 通用洗脱液,静置 3 分钟。
6.12000-15000 g 离心 1 分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的 Oligo 和引物溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
7.可以PAGE 电泳检查回收效-率,最好使用超高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约
OLIGO 样品的用量。
选择我们的Oligo和引物回收试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!