毛发线粒体 DNA 纯化试剂盒（沉淀法）毛干部分含有线粒体 DNA，随着近年来测序技术的发展，通过毛干线粒体检测更加准确。

产品简介：

毛发的主要成分是角化蛋白，可以抵抗自然界中大多数的酶和化学物质，不易分解，  正是因为毛发物证的不易破坏性、形态稳定性，毛发物证对于案件侦破具有关键作用。毛   发分毛根、毛干、毛尖三部分。毛根含有染色体 DNA，但自然脱落的毛发根部含染色体DNA 量极少。毛干部分含有线粒体 DNA，随着近年来测序技术的发展，通过毛干线粒体检测更加准确。目前市场上专门用于毛发样品 DNA 纯化的产品很少，为此本公司开发了本产品。

产品参数：

成分规格包装

毛发 DNA 提取溶液 A50 mL60 mL 本色瓶

毛发 DNA 提取溶液 B25 mL30 mL 棕玻瓶

毛发 DNA 提取溶液 C50 mL60 mL 本色瓶

毛发 DNA 纯化还原剂5 mL5 mL 本色瓶

蛋白酶K溶液（10 mg/mL）1 mL2.0 mL 红盖管

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脱液

（基因组纯化专用）10 mL10 mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

cccDNA 纯化溶液 A30 mL30 mL 棕玻瓶

cccDNA 纯化溶液 B10 mL10 mL 棕玻瓶

cccDNA 纯化溶液 C30 mL30 mL 本色瓶

使用手册1 份1 份

运输及保存

毛发线粒体 DNA 纯化试剂盒（沉淀法）常温运输及保存（其中蛋白酶 K 溶液需要低温运输，-20℃保存。溶液 B 需要常温运输， 4℃保存），有效期一年。

自备试剂

1.5 mL 塑料离心管、2 mL 塑料离心管。

使用方法：

1.将 30-50 mg 左右头发充分剪碎成芝麻大小，将剪碎后样本转移到一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中。注意：最好从靠近根部的地方剪取样品。

2.加入 1 mL 毛发 DNA 提取溶液 A、50 μL 还原剂和 20 μ L 蛋白酶 K 溶液（ 10 mg/mL），37℃保温 10 小时（一般过夜保温就可以）。注意：最好让反应体系处于摇晃状态，此保温长度一般可以让毛发溶化。

3.加入 0.5 mL 的毛发 DNA 提取溶液 B，振荡器上振荡 30 秒充分混匀。

4.12,000 rpm 室温离心 5 分钟，小心将上清转移到新的 2 mL 塑料离心管中。

5.在上清液中加入等体积的毛发 DNA 提取溶液 C，上下颠倒 30 秒充分混匀。

6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将 0.7-0.8 mL 混合液转移到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000 rpm 室温 1 分钟，弃穿透液。再把剩余的一半上柱，重复此操作。

7.将 0.7 mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，12,000 rpm 室温离心半分钟，弃穿透液。

8.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。

9.将离心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 0.2 mL DNA 洗脱液（基因组 DNA 专用）。

10.12,000 rpm 离心 1 分钟，管底即为头发 DNA 溶液。

11.在 0.2 mL 含有 cccDNA 的头发 DNA 溶液中，加入 0.6 mL cccDNA 纯化溶液A，充分吹打或振荡 2 分钟。

12.加入 0.2 mL cccDNA 纯化溶液 B，振荡 1 分钟。

13.室温 14,000 rpm 离心 3 分钟，小心将上清液（约 0.6 mL）转移到新的塑料离心管中。

14.在离心管中加入等体积（0.6 mL）cccDNA 纯化溶液 C，充分颠倒混匀。

15.室温 14,000 rpm 离心 15 分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀。

16.加入 1 mL 自备的 75%乙醇后，立即室温 14,000 rpm 离心 1 分钟，小心弃上清，不要吸走管底微量的沉淀

17.将离心管再次 14,000 rpm 离心半分钟，小心吸走残留的液体（约 50-100 μL）。

18.加入 10-100 μL 超纯水或 TE 缓冲液，轻柔吹打溶解后可以立即用于后续实验。长期放置需要放-20℃。

选择我们的毛发线粒体 DNA 纯化试剂盒（沉淀法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！