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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1908 |
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规格 | 200次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | / | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
本产品用于以哺乳动物卵裂球(blastomere,含 2-8 个细胞)和囊胚制备为起始材料制备单个细胞。
产品特点:
1.即开即用,不用单独优化条件。
2.所得到的单个细胞,可以用于后续分子生物学研究,包括全基因组扩增、PCR 扩增、RT-PCR、全转录组扩增或蛋白质研究。但不推荐用于细胞学研究, 不推荐用于细胞培养。
3.起始材料既可是哺乳动物卵裂球,也可以是哺乳动物囊胚。
4.本试剂盒足够 200 次制备,每次制备可以处理一个卵裂球或囊胚。
5.卵裂球及囊胚单细胞制备试剂盒只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
卵裂球及囊胚洗涤液2 mL×22 mL 本色管
透明带剥离液2 mL2 mL 白盖管
卵裂球及囊胚细胞解离液 A2 mL2 mL 红盖管
卵裂球及囊胚细胞解离液 B2 mL2 mL 黄盖管
使用手册1 份无
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂
待处理样品,显微操作系统、塑料培养皿。
使用方法:
一、洗涤卵裂球或囊胚
1.在干净塑料培养皿中点加 2 个 5 L 的卵裂球及囊胚洗涤液(以下简称洗涤液)小液滴。
2.在显微镜下用微量注射器转移一个卵裂球或囊胚到第一滴洗涤液中。此步将稀释掉卵裂球或囊胚带入的培养基等杂质,相当于进行了第 1 次洗涤。
3.然后再将卵裂球或囊胚转移到第二滴洗涤液中,相当于进行了第 2 次洗涤。。二、剥离透明质(囊胚没有透明带,如果样本为囊胚,可以跳过此步)
4.在干净培养皿中点加 2 个含 5 L 透明带剥离液的小液滴和 2 个含 5 L 洗涤
液的小液滴。
5.将卵裂球转移到第一个透明带剥离液小液滴中,相当于洗涤一次。
6.马上再将卵裂球转移到第二个透明带剥离液小液滴中。
7.在倒置显微镜下实时观察透明带剥离情况。一般 3-5 分钟后透明带将与细胞剥离。
8.将脱去透明带的卵裂球转到第一滴洗涤液中,此步将洗去透明带剥离液。
9.马上再将卵裂球转移到第二滴洗涤液中,此步将进一步洗去透明带剥离液。。三、解离单细胞
10.在一个干净的塑料离心管中将卵裂球及囊胚细胞解离液A和卵裂球及囊胚细
胞解离液 B 按 1:1 的体积比例新鲜混合得到单细胞解离液。每次用多少配多少。解离一个卵裂球或囊胚需要 20 L 单细胞解离液。
11.在干净培养皿中点加 2 个各含 10 L 单细胞解离液的小液滴。
12.将 1 个卵裂球或囊胚转移到第一个单细胞解离液小液滴中。
13.马上再将卵裂球或囊胚转移到第二个单细胞解离液小液滴中。
14.不时在倒置显微镜下实时观察单细胞解离情况,可以不时用显微注射针轻柔吹打以加速细胞解离。对只有两个细胞的卵裂球,解离过程一般需要 5 分钟, 对于囊胚,解离一般需要 3-5 小时。
15.细胞解离后,在显微镜下用显微注射仪将单个细胞分别转移到不同的 200 L
的 PCR 管中待用。注意取不含细胞的溶液做后续实验的阴性对照留存。
16.所得单细胞可以直接用于后续实验,包括单细胞裂解,单细胞全基因扩增、单细胞全转录组扩增等。
选择我们的卵裂球及囊胚单细胞制备试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!