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型号:
全基因组扩增试剂盒
描述:

全基因组扩增试剂盒适用于扩增没有降解的痕量样品、激光微切样品(Laser microdissection)、单细胞 DNA、单染色体或染色体片段。但不适合已经降解的 DNA。降解的 DNA 可选用本公司的 RCA 法全基因组扩增产品。

  • 厂商性质

    生产厂家
  • 更新时间

    2025-04-21
  • 访问量

    68
详细介绍
品牌烜雅生物货号XY-D-1628
规格50次供货周期现货
主要用途科研应用领域化工,生物产业
英文名称Forensic Nail DNA Extraction Kit保存条件-20℃
有效期12个月

产品简介:

Linker-Adapter PCR 是用限制性内切酶酶切基因组DNA,产生 100-1500 bp的片段,然后在其两端加上 Linker,最后用识别 Linker 的引物进行 PCR 扩增的一种全基因组 DNA 扩增技术。其原理示意图如下:

全基因组扩增试剂盒


产品特点:

1.即开即用,十分简单方便,用户不需要辛苦摸索条件。

2.所有反应一管式完成,不会有 DNA 的丢失。

3.适用于扩增没有降解的痕量样品、激光微切样品(Laser microdissection)、单细胞 DNA、单染色体或染色体片段。但不适合已经降解的 DNA。降解的 DNA 可选用本公司的 RCA 法全基因组扩增产品。

4.含荧光染料,可以实时监控扩增反应过程,不需要实验结束后再跑电泳,节约宝贵样品(因为需要进行全基因组扩增的样品都非常珍贵)。

5.可以将模板 DNA 扩增上万倍。

6.适用于探针标记,杂交,位点检测。但由于 Taq DNA 聚合酶的突变率较高,不推荐后续用于高通量测序。如果需要测序则建议使用 RCA 法扩增。

7.本产品足够 50 次 50 μL 体系的 LA-PCR 反应。

8.全基因组扩增试剂盒只能用于科研。


产品参数:

产品规格

成分规格包装
10×酶反应液50 μL0.5 mL 绿盖管
蛋白酶溶液25 μL0.5 mL 黄盖管
MseI 内切酶25 μL0.5 mL 橙盖管
引物 1干粉0.5 mL 白盖管
引物 2干粉0.5 mL 白盖管

ATP 溶液,10 mM

50 μL0.5 mL 紫盖管
T4 DNA 连接酶50 μL0.5 mL 红盖管

2×染料法 qPCR

MasterMix

1.3 mL1.5 mL 本色管
超纯水1.5 mL1.5 mL 蓝盖管
使用手册1 份

保存和运输

低温运输,-20℃保存, 有效期为一年。

自备试剂

纯化好的 DNA 模板、超纯水。


使用方法:

1.如果是纯化好的 DNA,则直接用在管中加入 4 μL DNA,0.5 μL 10×酶反应液,然后直接进入下表的加 0.5 μL MseI 内切酶进行酶切的步骤,后续步骤同。

2.如果是含蛋白质的微量样品、单个细胞,单个染色体或染色体片段,则按下表进

进行操作:

成分管 1

(样本)管 2

(无模板对照)

待处理样品不超过 3.5 μL-

10×酶反应液0.5 μL0.5 μL

蛋白酶溶液0.5 μL0.5 μL

加自备超纯水到 4.5 μL到 4.5 μL

42℃保温 15 小时后 80℃10 分种

各加入 0.5 μL MseI 内切酶,总体积为 5 μL

37℃保温 3 小时后 65℃ 5 分种

再加入下列成分

引物 11.0 μL1.0 μL

引物 21.0 μL1.0 μL

超纯水0.5 μL0.5 μL

10×酶反应液0.5 μL0.5 μL

此时总体积为 8 μL。放 PCR 仪上,从 65℃降温到 15℃,每

分钟降低 1℃。然后再加入下列成分

ATP 溶液,10 mM1 μL1 μL

T4 DNA 连接酶1 μL1 μL

此时总体积为 10 μL。15℃保温过夜。再加入下列成分

 

超纯水14 μL14 μL

引物 21 μL1 μL

2×染料法 qPCR

MasterMix25 μL25 μL

按下列参数进行 5 步式 PCR: 第一步:68℃3 分钟。

第二步:(94℃ 40 秒,57℃ 30 秒,68℃ 1 分 30 秒,每增加 1 个循环加 1 秒)共 14 个循环。在 68℃采集 SYBR 通道的荧光信号。

第三步:(94℃ 40 秒,57℃ 30 秒,每增加 1 个循环加 1

秒,68℃ 1 分 45 秒,每增加 1 个循环加 1 秒)共 8 个循环。在 68℃采集 SYBR 通道的荧光信号。

第四步:(94℃ 40 秒,65℃ 30 秒,68℃ 1 分 53 秒,每增加 1 个循环加 1 秒)共 22 个循环。在 68℃采集 SYBR 通道的荧光信号。

第五步:68℃3 分钟。

3.有扩增的将有平缓的 S 曲线,无模板对照见没有此曲线。

4.所得扩增产物可以纯化后用于各种后续实验,包括再扩增。

选择我们的全基因组扩增试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!

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