SDS-PAGE 电泳试剂盒使用含染料的改良浓缩胶缓冲液，浓缩胶呈蓝色，便于上样时识别加样孔。

产品简介：

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是目前电泳法变性分离蛋白质的 主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为了解决此问题，本公司开发了本产品。

产品特点：

1.一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。

2.安全，将实验人员接触粉末状丙烯酰胺的可能降到最-低。

3.灵活，用于可以用 30%的丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺母液，自行配制各种浓度的PAGE 胶，满足分离不同大小蛋白质的需求。

4.使用含染料的改良浓缩胶缓冲液，浓缩胶呈蓝色，便于上样时识别加样孔。

5.电泳后可直接用于考染、银染、Western 杂交等实验。

6.SDS-PAGE 电泳试剂盒只能用于科研。

产品参数：

产品规格

成份规格包装

5×SDS-PAGE 上样液1 mL1.5 mL 绿盖管

保存和运输

常温运输和保存，但 5×SDS-PAGE 上样液需低温运输，-20℃保存。有效期一年。

自备试剂

去离子水

使用方法：

注意：第一次使用本产品时需先配制 30%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺（19:1）溶液

（30% AB 溶液，下同）

1.在本产品提供的装有 57g 丙烯酰胺/3g 甲叉双丙烯酰胺干粉的瓶中加入 146 mL 自备的去离子水，充分摇晃 10-20 分钟即得 200 mL 30%丙烯酰胺/甲

叉双丙烯酰胺（19:1）溶液（以下简称 30%AB 溶液）。丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺比例在 19:1 时，PAGE 胶的孔径最小，分辨率最高。配好的 30%AB 溶液最好 4℃避光保存并在 1 月内用完。

2.根据平板的面积和胶的厚度估计需要配制的浓缩胶和分离胶的体积。并根 据要分离的蛋白质的大小确定选择浓缩胶和分离胶的浓度，参考下表:

注：如果上样体积少于 10uL，可以不需要浓缩胶。

3.配制 10%的 APS（过硫酸铵）：称 0.1 克过 APS 干粉到 1 mL 去离子水中， 摇晃溶解。没用完的 10%APS 溶液需 4℃存放，一周后就不能再用。

4.配制分离胶溶液：在一个 25 mL 的三角瓶中，先按下表的用量加入水、30% 的 AB 溶液和 4×分离胶缓冲液。以下是配制 10 mL 胶的用量，更大体积则各成分用量需按比例增加。丙烯酰胺溶液有神经毒性，一定要戴手套操作。

5.配制浓缩胶溶液（一般使用 4%的浓度）：在一个 25 mL 的三角瓶中，先按下表的用量加入水、30%AB 溶液和 4×浓缩胶缓冲液。以下是配制 10 mL 4%浓缩胶的用量，丙烯酰胺溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。

用量（单位：mL）

浓缩胶浓度

4%

水

6.17

30%AB 溶液

1.33

4×改良浓缩胶缓冲液2.50

6.将分离胶和浓缩胶溶液摇晃混匀，抽真空 10-15 分钟以去除溶液中的氧气

（氧气能抑制丙烯酰胺聚合反应，不去除将影响丙烯酰胺聚合反应，胶凝固时间会更长）。

7.各加入 50 uL 10%APS 和 40 uL TEMED（这是配制 10 mL 分离胶和浓缩胶的用量，更大体积的胶则用量需按比例增加)，迅速摇匀。

8.先灌分离胶，在分离胶的液面距离顶部 1.5 cm 的时候，停止灌胶。

9.由于分离胶比重较大，可以立即在上面灌浓缩胶，但灌注时必须小心，不要破坏分离胶和浓缩胶的交接面，在浓缩胶液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子， 室温聚合 30-60 分钟。也可以等分离胶在室温聚合 30-60 分钟，胶凝固后再灌制。

10.拔出梳子，用 1×SDS-PAGE 电泳液冲洗加样孔。本产品提供 20 升的 SDS- PAGE 电泳液干粉，将所有干粉溶解在 2L 去离子水中即得 10×SDS-PAGE 电泳液（测 pH 应该在 8.3，如果不是 8.3 务必-用 NaOH 或HCl 调到8.3），用时再用去离子水稀释成 1×工作液。

11.将凝胶板固定在电泳装置上，往上下槽加入足够的 1×SDS-PAGE 电泳液。

12.在待电泳的蛋白质样品中加入 5×SDS-PAGE 上样液(4uL 样品中加 1uL 上样液)，100℃煮沸 3-5 分钟。短暂离心，取上清上样。

13.先用 10 mA 的电流电泳（对 0.75 mm 厚×14 cm×14 cm 的胶)直到染料进入从浓缩胶进入分离胶。

14.将电流增加到 15 mA，直到染料进入分离胶底部时终止电泳，取出凝胶进行后续的染色等实验处理。

选择我们的SDS-PAGE 电泳试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！