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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1639 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | PAGE Protein Recovery Kit | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
SDS-PAGE 电泳不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量,而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一。随着蛋白质技术的微量化,可以从 PAGE 凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、用于免疫印迹实验、用于氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门针对此用途开发的 PAGE 凝胶蛋白回收试剂盒。
产品特点:
1.简单,不需要购买复杂而昂贵的仪器设备(如电洗脱仪)。
2.适用于变性胶(SDS-PAGE)、非变性胶(如 Blue PAGE)和其他任何 PAGE 凝胶。
3.蛋白的回收率一般在 50-90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。
4.回收的蛋白可用于后续多种实验,包括 2-D 电泳、质谱测序、抗体制备等。
5.本产品足够 50 次微量蛋白纯化。
6.PAGE 凝胶蛋白回收试剂盒(过柱法)只能用于科研。
产品参数:
产品规格
成分 | 规格 | 包装 |
过柱法PAGE 凝胶蛋白回收溶液A | 10 ml | 10 mL 本色瓶 |
离心吸附柱 | 50 个 | 塑料袋 |
使用手册 | 1 份 | 1份 |
保存和运输
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂
根据后续使用决定。
使用方法:
1.按常规方法进行变性 SDS-PAGE、尿素-PAGE,Tricine-SDS-PAGE 电泳,或非变性蛋白电泳,如 Bule PAGE。由于 PAGE 凝胶固定和染色后,蛋白回收效果很差,所以建议把蛋白样品同时上样到多个孔中并电泳。
2.电泳结束后,在对 PAGE 凝胶进行固定和染色时,切下其中一个样孔所对应的胶条进行固定和染色,其余的不固定不染色。
3.将出现蛋白条带后的胶条放回到在整个 PAGE 胶中此胶条切除前的位置, 通过胶条上的蛋白条带来找到在未染色胶上该蛋白预计出现的区域,并切下此区域的 PAGE 凝胶(含未固定和为染色的目的蛋白)进行回收。
4.去除含目的蛋白的胶条的多余凝胶,否则它们会影响蛋白回收效率。
5.将修整后的 PAGE 胶条转移到一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中,放-80℃过夜。
6.同时将一个非常干净的研钵和研磨杵放-20℃过夜。
7.次日,将凝胶倒入用研钵中,用研磨杵研磨成粉。
8.将凝胶粉转移到一个吸附柱中。
9.加入 100 μL 过柱法 PAGE 凝胶蛋白回收试剂溶液 A,放置 10 分钟。期间,凝胶将膨胀,继续补加,直到凝胶不再膨胀并且凝胶上层覆盖 1-2 mm 厚的液体。
10.室温 12,000×g 离心 3 分钟,收集穿透液,并转移到新的离心管中,标注为穿透液 1。
11.再加入过柱法PAGE 凝胶蛋白回收试剂溶液A,使得凝胶上层覆盖1-2 mm厚的液体。
12.室温 12,000×g 离心 3 分钟,收集穿透液,并转移到新的离心管中,标注为穿透液 2。
13.测定穿透液中的蛋白浓度或长度,可以直接进行后续实验,也可以放-20℃长期保存。
选择我们的PAGE 凝胶蛋白回收试剂盒(过柱法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!