蛋白胶中量回收试剂盒（沉淀法）每次可以处理 1 g 的 PAGE 胶（具体含多少蛋白质取决于上样的浓度）。

产品简介：

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）不仅可用于检测蛋 白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的中量蛋白胶回收法。

产品特点：

1.简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。

2.适用于变性 PAGE 胶（如 SDS-PAGE）和非变性 PAGE 胶。

3.每次可以处理 1 g 的 PAGE 胶（具体含多少蛋白质取决于上样的浓度）。

4.回收率一般在 50-90%之间（跟蛋白质亲水性、大小、洗脱时间相关）。

5.跟后续的实验兼容，包括 2-D 电泳、质谱测序、EMSA 或其它活性检测实验等。

6.蛋白胶中量回收试剂盒（沉淀法）只能用于科研。

产品参数：

产品规格

成份规格包装

蛋白胶中量纯化溶液 A5mL5 mL 本色瓶

蛋白胶中量纯化溶液 B50 mL50 mL 本色瓶

20mL 塑料注射器5 只塑料袋

使用手册1 份无

保存和运输

常温运输和保存，有效期一年。

自备试剂

无

使用方法：

1.按常规方法进行变性（SDS-PAGE）或非变性 PAGE 蛋白电泳。

2.切取含目的蛋白条带的 PAGE 胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。注意：PAGE 胶固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，  然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。

3.将切下的、重量不超过 1 克的胶块转移到 20 mL 塑料注射器中（不安装针头）。用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去，使之变成细小的碎片，  用自备的 15mL 塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。也可用其他方法捣碎 PAGE 胶条，包括液氮研磨。胶条越碎，蛋白回收率越高。

4.加入 1 mL 蛋白胶中量纯化溶液 A，4℃脱色摇床上摇晃洗脱至少 16 小时（过夜）。此期间最好将蛋白胶中量纯化溶液 B 放在-20℃冰箱预冷待用。

5.10,000 g 离心 10 分钟，转移上清（含回收蛋白）到新的 10-15mL 的塑料离心管中，注意不要吸取 PAGE 胶碎片。

6.加入 5 倍体积的预冷的蛋白胶中量纯化溶液 B，摇晃混匀。

7.-20℃放置至少 30 分钟。

8.室温 12,000 g（注意：一定要检查使用的离心管是否能够耐受此离心力， 如果不能建议将溶液分到 1.5 mL 的塑料离心管中再在台式离心机上进行离心处理）离心 20 分钟，小心弃上清，不要吸走沉淀。

9.室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在跟

后续测试兼容的缓冲液中，直接用于后续实验（2-D 电泳、质谱测序等）。

选择我们的蛋白胶中量回收试剂盒（沉淀法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！