RT-LAMP MasterMix（电泳法）即开即用，含有红色电泳示踪剂，扩增后可以直接上样，不需要上样液。

产品简介：

RT-LAMP MasterMix 含有 RT-LAMP 扩增所需的所有成分， 可以用于RT-LAMP 等温扩增。RT-LAMP 即 Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification（逆转录-环介导等温扩增），它利用 4 条模板专一的特异引物、逆转录酶和具有链置换能力的 Bst DNA 聚合酶，在等温条件下(63℃左右) 30－60 分钟完成逆转录和 LAMP 扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于定性 RT-PCR 技术，同时还不需要昂贵的仪器设备。目前已成功应用于生物的快速检测，广泛用于各个领域。

产品特点：

1.即开即用，含有红色电泳示踪剂，扩增后可以直接上样，不需要上样液。

2.高特异性，精心优化的配方，非特异扩增比自配的试剂更低。

3.高扩增效率，一般比 RT-PCR 灵敏一个数量级。

4.65℃左右逆转录和等温扩增，不需要贵重仪器。

5.本试剂盒足够 50 次 20 L 体系的 RT-LAMP 扩增。

6.提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。

7.20 L 体系可以加 10 L 的模板。

8.RT-LAMP MasterMix（电泳法）只能用于科研，不能用于临床。

产品参数：

产品规格

成分规格包装

RT-LAMP MasterMix

（含电泳示踪剂，待加酶）200 L0.5 mL 白盖管

逆转录酶-扩增酶混合液100 L0.5 mL 红盖管

阳性对照模板-引物混合物50 L0.5 mL 蓝盖管

使用手册1 份无

保存和运输

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂

RNA 模板、RT-LAMP 引物

使用方法：

1.制备模板RNA：用于选用合适的方法制备模板RNA。如果有N个样品，最好设置N+2个样品制备，多出的两个一个是样品制备阳性对照，一个是样品制备阴性对照。

2.配制5×RT-LAMP引物混合液。

先加超纯水将合成的HPLC级别的下列引物干粉稀释到标准所标注的母液浓度，然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯水，最后

得到1 mL的5×RT-LAMP 引物混合液，此混合液足够250次20 L体系的LAMP扩增。如果需要配制的5×RT-LAMP引物混合液体积异于1 mL，则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。

注：如果没有Loop引物，则用水替代。

3.在冰上融化RT-LAMP MasterMix（待加酶），混匀，稍离心。第一次使用时， 请将100uL 逆转录酶-扩增酶混合液全部加入到RT-LAMP MasterMix中并轻柔混匀，然后再使用。如果有N个样品，则在N+2个反应管中加入以下组份，  多出的一管是RT-LAMP扩增阳性对照（PC），一管是RT-LAMP扩增阴性对照

（NC）：

成份N+2 个样品管RT-LAMP

扩增PCRT-LAMP

扩增 NC

RT-LAMP MasterMix

（加酶后）6 L6 L6 L

自备 5×RT-LAMP 引物

混合液4 L不加4 L

阳性对照模板-引物混合物不加4 L不加

自备模板 RNA1-6 L不加不加

补自备超纯水到20 L20 L20 L

注意：由于本产品含有电泳示踪剂，不宜加入可视化染料，否则会产生颜色干扰。可加入某些荧光染料，具体可以加入哪些，需要预先测试电泳示踪剂对荧光染料的影响。如果加入了荧光染料，则需要在荧光定量PCR仪上进行反应和实时检测。

4.混匀，置于65℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温，必须加热盖。如果用金 属浴或水浴保温，没有热盖，必须覆盖50uL的石蜡油，否则保温期间反应体系的水分会蒸发，严重影响反应效率。

5.扩增结束后取5-10 L扩增产物直接上样（本产品含有红色电泳示踪剂，不需要再加上样液，红色示踪剂的泳动速度相当于50 bp的DNA）进行2-3%的琼脂糖凝胶电泳，有RT-LAMP扩增的样品将可见LAMP特征性DNA梯度电泳图谱

6.结果分析：如果本试剂盒提供的阳性对照-引物混合物能够扩增而阴性对照不能扩出，则实验有效。如果阳性对照-引物混合物没有扩增出条带，则试剂盒的问题，请跟厂家联系。如果阴性对照（水作为模板）有扩增出条带，则说明RT-LAMP 样品或试剂有过去的扩增产物的污染，需要注意操作的规范性，如果不能解决，

可以重新设计RT-LAMP引物扩增新的靶片段。

选择我们的RT-LAMP MasterMix（电泳法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！