CI 混合液（24:1，核酸纯化用）是氯仿-异戊醇（Chloroform-Isoamyl Alcohol, CI）的 24:1 的混合液，用于核酸提取时去除蛋白质、多糖、脂类和酚类等杂质。

产品简介：

本产品是氯仿-异戊醇（Chloroform-Isoamyl Alcohol, CI）的 24:1 的混合液，用于核酸提取时去除蛋白质、多糖、脂类和酚类等杂质。

再基于苯-酚的核酸纯化中，苯-酚的作用是使裂解液中的蛋白质变性，同时抑制核酸酶对核酸的降解。用苯-酚处理裂解液时，由于蛋白分子表面的很多极性基团与苯-酚相似相溶，故蛋白分子溶于酚相，而核酸溶于水相，从而将核酸和蛋白质分开。但苯-酚和水有 10%左右的互溶，因此酚抽提后，必须用 CI 混合液处理以让水和酚彻-底分开，彻-底去除水相中 10%左右的残留苯-酚，否则它们会严重抑制后续的酶反应。CI 混合液中异戊醇的作用是降低表面张力，从而减少操作过程（常常有震荡步骤）中气泡的产生，而这些气泡的表面张力可能会使核酸断裂。另外，异戊醇还有助于水相和酚相分相，使离心后的上层水相（含核酸）、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定，便于移取上清。

产品参数：

成分规格包装

CI 混合液（24:1，核酸纯化用）250 mL250 mL 棕玻瓶

使用手册1 份无

运输及保存

常温运输和保存，有效期为 12 个月。

自备试剂

无

使用方法：

如果用于沉淀法回收核酸，则需要无水乙醇或异丙醇、3 M 乙酸钠溶液 pH 5.2、75%乙醇和超纯水。如果用于过柱法回收核酸，则需要硅胶模离心吸附柱，上柱 液，洗柱液和超纯水。

该试剂为基于苯-酚的核酸提取过程中的必须试剂，使用方法参考分子克隆手册等参考书， 或实验室 SOP。下列操作仅以 0.5 mL 样本供参考。

一、沉淀法：

1.将 0.5 mL 含核酸的细胞裂解液，或含有核酸、DNA、蛋白质、脂类的混合液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。

2.加入 0.5 mL 的自备 Tris-饱和酚（对 DNA 纯化）或酸酚（对 RNA 纯化）和 0.2 mL 的本产品。

3.涡旋震荡 2 分钟。

4.常温 13000×g 离心 5 分钟，溶液将呈两层相。将含有核酸的水相转移到一个新的离心管中。两相的相对位置跟样本比重有关，并不是任何时候无色水相都在上层。如果样本含盐浓度高，比重大，水相也可能在下层。

5.在上清中加入 0.1 倍体积的 3 M 乙酸钠溶液，pH 5.2 和两倍体积的自备无水乙醇（两倍体积的乙醇可以用一倍体积的异丙醇替代），颠倒 10 次充分混匀。

6.常温 13000×g 离心 15 分钟。

7.小心弃上清，不要触及管底离心面的沉淀。

8.加入 1 mL 75%乙醇，颠倒 10 次。

9.常温 13000×g 离心 3 分钟。

10.小心弃上清后短暂离心 30 秒，去掉残留的液体（约 50uL）。

11.室温敞开盖子两分钟。

12.加入超纯水溶解核酸，然后进行浓度测定、电泳，PCR 等后续检测。

二、过柱法：

13.将 0.5 mL 含核酸的细胞裂解液，或含有核酸、DNA、蛋白质、脂类的混合液转移到 1.5 mL 塑料离心管中。

14.加入 0.5 mL 的自备 Tris-饱和酚（对 DNA 纯化）或酸酚（对 RNA 纯化）和 0.2 mL 的本产品。

15.涡旋震荡 2 分钟。

16.常温 13000×g 离心 5 分钟，溶液将呈两层相。将含有核酸的无色水相转移到一个新的离心管中。两相的相对位置跟样本比重有关，并不是任何时候无色水相都在上层。如果样本含盐浓度高，比重大，也可能在下层。

17.在上清中加入 2 倍体积的自备上柱液，所用体积跟所用上柱液的配方相关。

18.颠倒混匀，取 0.7 mL 样本和上柱液的混合液上柱。

19.常温 13000×g 离心半分钟，弃穿透液。

20.再取 0.7 mL 样本和上柱液的混合液上同一个柱子。

21.常温 13000×g 离心半分钟，弃穿透液。

22.重复第 20-第 21 步，直到混合液全部上柱。

23.加入 0.7 mL 洗柱液。

24.常温 13000×g 离心半分钟，弃穿透液。

25.重复第 23 和第 24 步一次。

26.不加任何溶液，将吸附柱离心半分钟。

27.在吸附柱中加入 30-50 μL 的超纯水，室温放置 2 分钟后，将吸附柱放入一个新的 1.5 mL 离心管中，13000×g 离心半分钟，收集的穿透液就是纯化的核酸溶液。

28. 对所得的核酸溶液进行浓度测定、电泳，PCR 等后续检测。

选择我们的CI 混合液（24:1，核酸纯化用），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！