改良Lowry法蛋白定量试剂盒即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。本产品只能用于科研。

产品简介：

Folin 酚（福林酚）试剂（磷钼酸和磷钨酸混合物）跟蛋白质中含酚氨基酸（色-氨酸和酪-氨酸）发生颜色反应，可用于测定蛋白质浓度，但灵敏度较低。Lowry 在此基础上加入 Biuret（双缩脲）反应步骤，即先在碱性条件下使蛋白质和 Cu+形成复合物，再使其与 Folin 酚试剂发生显色反应，产物在 750nm 检测。Lowry 法使不含酚的蛋白质也能被检测出来，灵敏度是单独使用 Folin 酚的 10 倍左右，是双缩脲反应的 200 倍，因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。Lowry 法检测原理图如下：

产品特点：

1.即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。

2.能抵抗部分干扰物（如一定浓度 SDS 或其他去污剂）的干扰。

3.检测线性范围广，在 2-100 g，检测上限比经典 Lowry 法高 30%-40%。

4.改良Lowry法蛋白定量试剂盒只能用于科研。

产品参数：

成分 规格包装

改良Lowry 法蛋白定量溶液A1 208 mL250 mL 本色瓶

改良Lowry 法蛋白定量溶液A216 mL30 mL 本色瓶

改良Lowry 法蛋白定量溶液A3 16 mL30 mL 本色瓶

改良 Lowry 法蛋白定量溶液 B 80 mL125 mL 本色瓶

改良 Lowry 法蛋白定量溶液 C 80 mL125 mL 本色瓶

福林酚 10 mL10 mL 棕色瓶

BSA 标准品，2 mg/mL 1 mL1.5 mL 本色管

使用手册 1 份无

运输及保存

常温运输和保存，但 BSA 标准品需要-20℃保存，有效期 12 个月。

自备试剂

去离子水，蛋白样品，样品缓冲液。

使用方法：

一、工作液的制备

1.制备溶液A：将16 mL改良Lowry 法蛋白定量溶液A2 和16 mL改良Lowry法蛋白定量溶液 A3 加入到装改良 Lowry 法蛋白定量溶液 A1 的塑料瓶中， 混合均匀得到 240 mL 改良 Lowry 法蛋白定量溶液溶液 A。

2.制备改良 Lowry 法蛋白定量工作液：将改良 Lowry 法蛋白定量溶液 A、改良 Lowry 法蛋白定量溶液 B 和改良 Lowry 法蛋白定量溶液 C 按 3：1：1 的体积比混合得到改良 Lowry 法蛋白定量工作液。此工作液可以室温放置2-3 周，所以最好用多少配多少。如果发现改良 Lowry 法蛋白定量溶液 B 或改良 Lowry 法蛋白定量溶液 C 有沉淀，需 37℃溶解并摇匀后再使用。

3.制备福林酚工作液：在装有 10 mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入 90 mL 去离子水，摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置 6 个月。

二、试管法

4.先用去离子水将 BSA 标准品，2 mg/mL 稀释到 50 g/mL，然后在标记的试管中加入下列成分（单位：L）。注意：每个样品最好做三个稀释度，

每个稀释度最好设置三次重复，阴性对照和标准品也最好做三次重复。

标准品（每个做三次重复，此处只列出一个）

编号BSA 标准，50 g/mL水总体积

阴性对照00200

10200200

225175200

350150200

4100100200

515050200

62000200

样品（以 1 个样品、3 个稀释度为例，

每个稀释度三个重复，此处只列出一个）

编号样品总体积

1200（稀释度 1）200

阴性对照 1200（用稀释度 1 稀释的溶解蛋白样

品的缓冲液）200

2200（稀释度 2）200

阴性对照 2200（用稀释度 2 稀释的溶解蛋白样200

品的缓冲液）

3200（稀释度 3）200

阴性对照 3200（用稀释度 3 稀释的溶解蛋白样

品的缓冲液）

200

5.每管中加入 200 L 改良 Lowry 法蛋白定量工作液，振荡混匀后室温反应10 分钟。

6.每管中加入 100 L 福林酚工作液，振荡混匀后室温反应 30 分钟。

7.用容量为 0.5 mL、光径为 1 cm 的玻璃比色杯或聚苯乙烯比色杯测定750nm 的光吸收。测定时，先空白（即阴性对照）后样品，测定样品和 BSA 标准品时，先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净，必要  时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。

8.根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线，然后根据未知样品的光吸收从  标准曲线中查得其对应的浓度。

三、96 微孔板法

9.同上，只是反应用 96 微孔板设置，用酶标测试仪 750 nm 测定光吸收。四、样品中干扰物质的去除

10.如果样品中有干扰 Lowry 法蛋白定量的物质，可用自备试剂按下法去除：

用水将样品调到体积为 200 L,加入 20 L 的 0.15%去氧胆酸钠，混匀，室温放置 10 分钟。加入 20 L 的 72%的 TCA，室温放置 5 分钟。3000 g 离心 15 分钟，小心去除上清。用 200 L 水溶解蛋白沉淀后以用于 Lowry 法测定。

选择我们的改良Lowry法蛋白定量试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！