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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1707 |
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规格 | 25T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | / | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
本产品是用于MDA(Multiplex Displacement Amplification)技术的全基因组DNA扩增试剂盒,它利用随机引物结合在全基因组(变性后)的不同位 置,然后利用具有超长DNA合成能力的phi29 DNA聚合酶,进行链取代合成。MDA扩增DNA的示意图如下:
产品特点:
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超-强链取代能力,故所得扩增DNA突变率比PCR低至少10倍。
2.可以将基因组DNA扩增上万倍,非常适用于痕量珍贵样品。
3.可使用各种来源的样品,尤其是痕量法医样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞,真菌和病毒等。
4.操作简便快捷,恒温(30℃)反应,无须贵重PCR仪即可实现扩增。
5.含有荧光染料,故可以实时检测扩增效果,不需要反应结束后电泳检测,避免浪费宝贵的扩增产物。
6.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异, 微卫星差异,SNP,STR)等。
7.本产品足够30次20 L体系的全基因组扩增。
8.实时全基因组扩增试剂盒(MDA 荧光染料法)只能用于科研,且只适用于扩增纯化好的基因组DNA。
产品参数:
成分 规格包装
溶液A 30 μL0.5 mL 蓝色盖
MDA 专用随机引物溶液 60 μL0.5 mL 棕色管
20×饱和染料30 μL0.5 mL 棕色管
10×DNA 环化-扩增缓冲液 60 μL0.5 mL 绿色盖
dNTP(25 mM) 30 μL0.5 mL 白色盖
DNA 环化酶A 15 μL0.5 mL 紫色盖
DNA 环化酶B 15 μL0.5 mL 紫色盖
Phi 29 DNA 聚合酶
(10 U/μL) 15 μL0.5 mL 红色盖
使用手册 1 份无
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂
纯化好的基因组 DNA
使用方法:
1如果有 N 个 DNA 模板,则标记 2N 个PCR 管,多出的一组为不加模板的阴性对照管。
2设置 20 μL 的扩增反应
330℃保温 12 小时。最好使用PCR 仪进行 30℃保温(注意:不是 37℃)并打开热盖保温。每 10 分钟设置成一个循环,采集一次 SYBR 通道的荧光信号。由于是可以实时检测反应,所以反应不一定要在设置时间到达后结束,可以在扩增曲线进入平台期后(已经没有新的 DNA 合成)结束。
465℃保温 10 分钟使phi29 DNA 聚合酶灭活。注:由于 phi29 DNA 聚合酶有 DNA 外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
5典型实验结果。有扩增的样本将有平缓的 S 荧光曲线,无模板对照将没有此标准扩增曲线或扩增曲线。
6若采用 30℃金属浴或水浴,必须在样品管中加入 50 μL 石蜡油以防水分蒸发,使用电泳检测或 PCR 检测是否有扩增。
7扩增所得 DNA 可以用于后续实验。
选择我们的实时全基因组扩增试剂盒(MDA 荧光染料法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!