您好,欢迎进入上海烜雅生物科技有限公司网站!
品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1743 |
---|---|---|---|
规格 | 10mL | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | / | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 1年 |
产品简介:
核酸杂交是指用一种标记的核酸探针与印迹膜上的核酸进行杂交,由此检测印迹膜上是否存在与探针同源的核酸分子。当探针是 Oligo 分子时,需要使用专门的核酸杂交液,本产品就是为此开发的 Oligo 探针专用杂交液。
产品特点:
1.即开即用,使用方便。
2.既可以用于 DNA Oligo 探针杂交,也可以用于 RNA Oligo 探针杂交。
3.本产品足够 5 平方厘米印迹膜的 10 次核酸杂交。
4.高效核酸杂交液(Oligo 探针专用)只可用于科研。
产品参数:
成分规格包装
高效核酸杂液(Oligo 探针专用)10 mL10 mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂
印迹膜,Oligo 探针,6×SSC,2×SSC,0.1×SSC
使用方法:
一、杂交温度的确定
1.Oligo 探针的最佳杂交温度一般比Tm 低5℃。计算Tm 的公式是Tm=GC数量×4℃+AT 数量×2℃。但由于 Oligo 较短,更容易受各种因素影响
(如错配率、修饰碱基比例等),所以最佳温度可能还需要适度摸索和优化。Oligo 探针可以在室温洗膜。
二、预杂交
2.将转膜所得的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6×SSC 溶液中,使其充分湿润。
3.将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋最好预先封口,再剪掉一 角,留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 本产品的比例沿小口加入本产品,然后用塑料封口机将口封牢。
4.将此塑料袋浸没入温度设定在最佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中, 保温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停的摇动状态中,使本产品与印迹膜充分接触。
三、杂交
5.将 Oligo 探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪刀剪一小口,加入 Oligo 探针后用热封机封口)。Oligo 探针的加入量视探针标记效率而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷贝基因,Oligo 探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则 Oligo探针的量可减少。如果是放射性 Oligo 探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
6.在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。四、洗膜
7.杂交完毕,取出塑料袋,剪去一角,倒出所有的含 Oligo 探针的杂交液。
此含 Oligo 探针的杂交液可以多次使用。
8.剪开杂交袋,用镊子取出印迹膜,浸没于大量的 2×SSC(含 0.5 % SDS)溶液中,室温下振荡漂洗 15 分钟。洗膜时一定不要使印迹膜干燥。
9.重复上步操作一次。
10.将印迹膜转移至 0.1×SSC(含 0.1% SDS)溶液中,在计算好的洗膜温度下振荡漂洗 30 分钟至 1 小时。
11.重复上步操作一次。
12.将印迹膜转移到滤纸上,吸去表面液体后印迹膜即可用于后续检测。
选择我们的高效核酸杂交液(Oligo 探针专用),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!