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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1752 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | Nucleus DNA Purification Kit | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 1年 |
产品简介:
本产品是专门用于从纯化好的细胞核中提取其基因组 DNA 的产品。
产品特点:
1.快捷,整个过程室温操作约 10 分钟。
2.DNA 纯净,大多数 DNA 样品的 OD260/280 值在 1.8-1.9 之间。
3.DNA 产率一般在 200ug/g 左右。
4.得到的 DNA 可直接用于 PCR、酶切、杂交等后续反应。
5.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
7.细胞核 DNA 纯化试剂盒(过柱法)只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
细胞核 DNA 纯化溶液 A20 mL30mL 本色瓶
细胞核 DNA 纯化溶液 B10 mL10mL 本色瓶
细胞核 DNA 纯化溶液 C45 mL60mL 本色瓶
离心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60mL 本色瓶
DNA洗脱液(基因组专用)10 mL10mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
常温运输和保存、有效期一年。
自备试剂
氯仿(也可省略,但产量会降低)
使用方法:
注意:细胞核 DNA 纯化溶液 A 容易产生沉淀,细胞核 DNA 纯化溶液 B 十分粘稠, 用前均需要在 65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
1.用自备的试剂分离细胞核,去除细胞浆。
2.在每 1-5×10E6 个细胞核沉淀中加入 0.4mL 预热的细胞核 DNA 纯化溶液 A,用枪充分吹打以确保细胞核全部裂解。
3.加入 0.2mL 预热的细胞核 DNA 纯化溶液 B 到裂解液中,盖上盖子后颠倒 2 分钟充分混匀。由于细胞核 DNA 纯化溶液 B 十分粘稠,可将 1mL 枪头剪掉一截再用。
4.65℃水浴 5-10 分钟。如果室温放置,DNA 产量将降低 10-20%。
5.加入 0.2 mL 自备氯仿,振荡器上充分振荡混均 30 秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。如果没有氯仿,此步可以跳过,直接进入第 8 步,但 DNA 产率和纯度会有所降低。
6.12000-15000 g 室温离心 2 分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。如果没有氯仿,此步跳过。
7.小心将上清液平均转移到 1 个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
8.在管中加入 0.9mL 的细胞核 DNA 纯化溶液 C,颠倒半分钟混匀。
9.分两次上柱( 即先转移一半的混合液到离心吸附柱中, 室温放置 2 分钟, 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟,12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液)。
10.加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
11.加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
12.12000-15000 g 室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染 DNA。
13.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
14.将离心吸附柱转移到一新的 1.5 mL 塑料离心管中,加入 100 uL DNA 洗脱液(基因组专用),室温放置离心吸附柱 1-2 分钟。
15.12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 DNA 样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
选择我们的细胞核 DNA 纯化试剂盒(过柱法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!