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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1773 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | Endotoxin Removal Reagent for DNA Solution | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 2年 |
产品简介:
革 兰 氏 阴 性 细 菌 ( 如 大 肠 杆 菌 ) 的 细 胞 表 面 的 结 构 成 分 LPS(lipopolysaccharides,脂多糖)就是内毒素,因此纯化的革兰氏阴性细菌基因组 DNA 和质粒 DNA 中几乎都有内毒素污染。内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均具有显著的毒性作用,这也是为何被叫做内毒素的原因。因此去除DNA 样本中的内毒素具有重要的意义,本产品就是专门用于高效去除 DNA 样品中的内毒素污染的试剂。
产品特点:
1.简单快速,一次处理只需要 30 分钟左右,不需要复杂仪器设备。
2.高效,一次处理可以去除 90%以上的内毒素,经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到 0.2 EU (Endotoxin Unit,约 0.1 ng LPS)/mL 以下。
3.不影响 DNA 的活性和完整性,处理过的 DNA 可以直接用于活体细胞科研或活体生物科研,也可以用于常规的分子生物学研究。
4.适用范围广,可用于处理各种来源的 DNA(基因组 DNA 和质粒 DNA)和各种形状的 DNA(单链和双链,线状和环状)。
5.既可小规模使用(在 1.5 mL 离心管内),也可放量使用。
6.本产品提供的试剂足够进行 50 次处理(每次处理 300 L 样本,每个样本处理三次)。
7.DNA 溶液内毒素清除剂只能用于科研。
产品参数:
成分规格包装
DNA 溶液内毒素清除溶液 A1.5 mL1.5 mL 白盖管
DNA 溶液内毒素清除溶液 B1.5 mL1.5 mL 蓝盖管
使用手册1 份无
运输及保存
常温运输和保存,有效期两年。
自备试剂
TE、无水乙醇、75%乙醇。
使用方法:
一:微量处理(用于体积小于 300 L 样品)
1. 在一干净的 1.5 mL 的塑料离心管中加入浓度在 0.1-1 g/L 的 300 L 的待处理 DNA 样品(来于基因组 DNA 提取和质粒 DNA 提取)。如果体积不足 300 L,可以用自备的 TE 补足到 300 L。如果浓度不到此范围,可以
用本公司的核酸浓缩剂浓缩或乙醇沉淀后再用小体积 TE 溶解。
2.加入 30 L DNA 溶液内毒素清除溶液 A。
3.加入 10 L DNA 溶液内毒素清除溶液 B,涡旋振荡器充分震荡 1 分钟混匀。
4.台式摇床上室温摇晃 20 分钟。
5.再放置到金属浴上 50℃保温 10 分钟。
6.台式离心机室温 13000-15000×g 离心 3 分钟,离心后上层为无色透明, 下层为淡蓝色。注意:此步不能低温离心。
7.小心将上清(含 DNA)转移到新的离心管中,注意不要吸取下层(含内毒素)的液体。
8.此上清液就是去除内毒素后的 DNA 溶液,留样少许,剩下的样品可以重复3-7 步两次,最后比较三次处理得到的 DNA 溶液的残留内毒素含量,并据此确定今后处理此类 DNA 溶液所需要的抽提次数。一般对内毒素污染严重的 DNA 溶液(含 1000 EU 左右的),需要抽提三次。如果起始含量低的,可能只需要一次。
9.加入自备的两倍体积的无水乙醇,混匀后 13000-15000×g 离心 5 分钟。
10.小心吸弃上清。
11.加入 1mL 自备的 75%乙醇,颠倒 3 次。12. 13000-15000×g 离心 2 分钟。
13. 小心吸弃上清。
14. 13000-15000×g 离心 10 秒。
15.小心吸弃残留上清(约 50 L)。
16.加入适量的 TE 溶解 DNA 沉淀。
17.测试残留内毒素的含量。如果内毒素含量已经减低到可以接收的水平,则可将 DNA 溶液用于各种后续实验,包括酶切电泳,活性检测,处理培养细胞, 打入活体实验动物等。注意:本产品只能用于科研,故不能将得到的 DNA 打入人体。
二:用于体积大于 500 L 的 DNA 样品
18.整个操作同上,只是在 15 或 50 mL 塑料离心管中进行,离心速度不能超过离心管的承受力。
选择我们的DNA 溶液内毒素清除剂,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!