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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1783 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | Liquid Sample DNA Purification Kit | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 1年 |
产品简介:
本产品专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽-拭子、鼻-拭子、口腔拭子、阴道 拭子等)挤出液中提取微量 DNA 的产品。
产品特点:
1.操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右。
2.不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
3.灵敏度高,通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 50 拷贝/mL 以下。
4.安全无毒,不需要使用苯-酚和氯仿等有机溶液。
5.如果加上病毒离心富集步骤,最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样品。
6.与 PCR 和荧光PCR 兼容。
7.价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
8.适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
9.本产品足够 50 次微量提取。
10.液体样品 DNA 纯化试剂盒(过柱法)只能用于科研。
产品参数:
成分规格包装
液体样品 DNA 裂解液30 mL30 mL 本色瓶
上柱结合液40 mL60 mL 本色瓶
离心吸附柱50 套塑料袋
通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶
DNA 洗脱液(基因组纯专用)10 mL10 mL 本色瓶
使用手册1 份无
运输及保存
温运输及保存,DNA 病毒裂解液长期(1 月以上)放置时需要放 4℃,有效期一年。
自备试剂
生理盐水, 1.5 mL Nase-free 离心管。
使用方法:
1.如果有 N 个样品,标记 N+2 个 1.5-2 mL 螺旋盖塑料离心管,多出的一个为阳性对照,一个为阴性对照。为避免污染,建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记,以在后续操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加入 0.2 mL 液体样品(血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等),阳性对照和阴性对照。
1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品,则将拭子放入 0.2 mL 自备生理盐水中挤压出液体,然后取 0.2 mL 进行提取。
1.2、 如果是粪便等半固定样品,则取约 0.3 mL 的样品,加入 0.3 mL 自备生理盐水,震荡重悬,离心取 0.2 mL 上清进行提取。
1.3、 如果血液,细胞培养液等含细胞的液体,可以离心后使用上清。血浆的抗凝剂必须是 EDTA 或 ACD,不能是肝素,否则肝素会抑制 PCR。使用ACD时由于所加入 ACD 会增加体积,样品会被稀释,得到的病毒滴度会比使用 EDTA 低 15%左右。血浆最好按 0.6 mL/管的量分装保存,以避免反复冻融。
1.4、 如果样品是实体组织或培养细胞,则需要在自备生理盐水中匀浆后离心,取
0.2 mL 上清液(含病毒)进行提取,但此种情况下最后得到的液体 DNA 不可避免的会含有少量基因组 DNA 污染(但不影响PCR 检测)。
1.5、 如果富集液体样品中的病毒,可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液体在 4℃
24,000 g 冷冻离心 60 分钟, 移弃 1.3 mL、用剩下的 0.2 mL 继续操作。
2.加入 0.6 mL 液体样品 DNA 裂解液到各离心管中,振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟裂解病毒。注意:液体样品 DNA 裂解液在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻-底溶解并充分摇匀后再取用。
3.加入 0.8 mL 上柱结合液到离心管中,颠倒混匀后转移一半的混合液(0.8 mL)到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
4.12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
5.将剩余的另外一半裂解液(0.8 mL)转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
6.12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
7.加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8.加入 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤,可以跳过。
9.12,000 rpm 室温离心半分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
10.将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的 1.5 mL RNase-free 离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 L DNA 洗脱液(基因组纯化专用),然后室温放置 2 分钟。
11.12,000 rpm 室温离心 1 分钟,离心管中的溶液即为病毒期保存。
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