LAMP 专用钙黄绿素溶液，20×，即开即用，含有 Mn 离子，可以直接加入到含 Mn 的 LAMP 扩增体系中。

产品简介：

钙黄绿素（Calcein）的 CAS 号为 1461-15-0，其分子结构式如下：

钙黄绿素可用作 LAMP 可见光染料，其原理是在有Mn 离子存在的 LAMP 扩增体系，如果没有 LAMP 核酸扩增发生，Mn 离子和钙黄绿素结合，在紫外照射时不发荧光。如果有 LAMP 核酸扩增发生，则 DNA 合成时将产生大量焦磷酸，这些焦磷酸将优先跟 Mn2+结合，钙黄绿素则跟体系中多余的Mg2+结合，在紫外照射时将发荧光。标准 LAMP 反应中的镁离子浓度通常在 4-10mM 之间（跟引物浓度， dNTP 浓度相关）。其原理图如下：

产品特点：

1. 即开即用，含有 Mn 离子，可以直接加入到含 Mn 的 LAMP 扩增体系中。

2.其最佳用量根据 LAMP 体系不同需要用户自己优化，但一般需要终浓度为 0.5 mM 的 Mn 离子，Mg 离子终浓度跟标准 LAMP 反应的Mg 离子浓度一样。

3.本产品足够 1000 次左右的 20 μL 体系的 LAMP 反应。

4.LAMP 专用钙黄绿素溶液，20×只能用于科研。

产品参数：

成份规格包装

LAMP 专用钙黄绿素溶液，1 mL2 mL 棕色管

使用手册1 份1 份

运输及保存

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂

无

使用方法：

1.将本产品放置在室温融化 30 分钟，震荡 10 秒钟，短暂离心后放冰上待用。

2.按下表设置 20 μL 体系的 LAMP 反应：

成份样品管阴性对照

4×LAMP Mix5 μL        5 μL

自备 FIP 引物终浓度0.8 μM0.8 μM

自备 BIP 引物终浓度0.8 μM0.8 μM

自备 F3 引物终浓度0.2 μM     0.2 μM

自备 B3 引物终浓度0.2 μM     0.2 μM自备 Loop F 引物终浓度（可选项）     0.4 μM     0.4 μM自备 Loop B 引物终浓度（可选项）     0.4 μM     0.4 μM

自备模板 DNA1-100ng    不 加

Bst DNA 聚合酶(8 U/μL)1.5 μL1.5 μL MnCl2 溶液，5 mM2 μL2 μL

本产品1μL1μL

补水到20 μL20 μL

3.65℃保温 1 小时。

4.LAMP 扩增后在紫外灯下检测，有核酸扩增的将发荧光，管中液体颜色为黄绿色。没有扩增的将不发荧光，管中液体颜色为橘黄色。典型的实验结果如下（左边的有扩增，黄绿色。右边的没有扩增，溶液颜色为橘黄色）：

5.也可以电泳检测实验结果（强烈不推荐此法，因为电泳时产生的气溶胶非常容易污染环境，使得今后用同一引物扩增时产生假阳性）：取 5-10 μL 扩增产物和自备的上样液混合，上样，进行 2-3%的琼脂糖凝胶电泳，有 LAMP 扩增的样品将可见 LAMP 特征性电泳图谱。

选择我们的LAMP 专用钙黄绿素溶液，20×，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！