海洋动物 DNA 纯化试剂盒（过柱法）使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等试验。

产品简介：

本产品是在动物 DNA 纯化试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物及其他软体动物的基因组 DNA 提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、乌贼、蜗牛等动物，可以有效去除海洋动物及其他软体动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。

产品特点：

1.使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等试验。

2.提取到的基因组 DNA 完整性，其中最长可以到达长度一般在 20-50kb。

3.DNA 纯净，OD260/280 一般都在 1.9 左右、DNA 片段大小在 30-50Kb 左右，可直接用于 PCR、酶切、杂交等。

4.操作简单安全，1 小时内即可获得超纯的基因组 DNA，纯化过程中不需要使用苯-酚氯仿等有机试剂。

5.应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。

6.性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。

7.海洋动物 DNA 纯化试剂盒（过柱法）只能用于科研。

产品参数：

成分规格包装

海洋动物 DNA 纯化溶液 A50mL60mL 本色瓶

海洋动物 DNA 纯化溶液 B15mL20mL 棕色瓶

海洋动物 DNA 纯化溶液 C50mL60mL 本色瓶

蛋白酶 K 溶液，10mg/mL1mL1.5mL 白盖管

通用洗柱液50mL60mL 本色瓶

DNA 洗脱液

（基因组纯化专用）10mL10mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

使用手册1 份无

运输及保存

常温运输和保存，但蛋白酶 K 溶液(10mg/mL)需要低温运输，-20℃保存，有效期

一年。

自备试剂

无水乙醇、RNase A 溶液（100mg/mL）

使用方法：

1.使用前请先在海洋动物 DNA 纯化溶液 C 中加入 17mL 自备的无水乙醇，在专用洗柱液中加入 60mL 的自备无水乙醇。

2.切取不多于 30mg 的海洋动物及其他软体组织材料，放入装有 200μL 海洋动物

DNA 纯化溶液 A 的离心管中，涡旋振荡 15 秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过 20mg。如果需要去除 RNA，可加入自备的 40μL RNase A（100mg/mL）溶液，振荡 15 秒，室温放置 5 分钟。

3.加入 20μL 蛋白酶 K 溶液，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在 56℃下放置，直至海洋动物组织完-全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。注意：不同动物组织裂解时间不同，通常需 0.5-2 小时即可完成。扇贝组织 0.5 小时基本可裂解完-全，虾和鱼类组织 1 小时。每小时振荡混合样品 2-3 次，每次振荡混匀 15 秒。

4.加入 200μL 海洋动物 DNA 纯化溶液 B，充分颠倒混匀，70℃放置 10 分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入海洋动物 DNA 纯化溶液 B 时可能会产生白色沉淀，一般 70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻-底，可能导致提取 DNA 量少和提取出的DNA 不纯。

5.在混合液中加入 200μL 无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。

6.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个硅胶膜离心吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm 离心 30 秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。

7.向离心吸附柱中加入 500μL 海洋动物 DNA 纯化溶液 C，12,000rpm 离心 30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。

8.向吸附柱中加入 600μL 专用洗柱液，12,000rpm 离心 30 秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。

9.重复上步操作一次。

10.将硅胶膜吸附柱放回收集管中，12,000rpm 离心 2 分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻-底晾干吸附材料中残余的专用洗柱液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的专用洗柱液去除，否则其中的乙醇残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR 等）实验。

11.将硅胶膜离心吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μLDNA 洗脱液（基因组纯化专用），室温放置 2-5 分钟，12,000rpm离心 1 分钟，将溶液收集到离心管中。注意：专用 DNA 洗脱液的体积不应少于 50μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组 DNA 的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000rpm 离心 1 分钟。洗脱液

的 pH 值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其 pH 值在7.0-8.5 范围内，pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率；且 DNA 产物应保存在-20℃，以防 DNA 降解。

选择我们的海洋动物 DNA 纯化试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！