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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1892 |
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规格 | 1mL | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | 2×Saliva Probe qPCR MasterMix | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 1年 |
产品简介:
本产品是在探针法 qPCR MasterMix 基础上改进的产品,可以直接用唾液为模板进行 PCR 扩增,不需要任何 DNA 纯化过程。
产品特点:
1.以 2×Mix 提供,用户只需准备模板、引物和探针即可以进行探针法实时定量 PCR。
2.直接以唾液为模板,不需要任何 DNA 纯化和释放过程。
3.唾液用量可高达到总反应体积的 35%,20uL 体系可以用 7uL 唾液,避免了漏检。
4.灵敏度高,可以检测 10 拷贝的 DNA/反应。
5.提供足够 8 次的阳性对照引物、探针和模板。
6.可用于基因表达分析、SNP 分析、拷贝数分析等实验。也可以用于定性检测。
7.本产品反复冻融 20 次对扩增效果没有任何影响。
8.本产品足够 100 次 20uL 体系的探针法 qPCR 反应。
9.2×唾液直扩探针法 qPCR MasterMix只能用于科研。
产品参数:
成份规格包装
2×唾液直扩探针法 qPCR
MasterMix1 mL1.5mL 红色盖
人基因组 DNA 溶液
(10E4 拷贝/uL)50uL0.5mL 蓝盖管
使用手册1 份无
运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂
唾液、自备引物、超纯水。
使用方法:
下列操作以定性实验为例
1. 如果有 N 个样品,则设置 N+2 个反应,多出的一个是扩增阴性对照(NC),一个是扩增阳性对照(PC)。可以使用确认能被所用引物和探针扩增并检测的 DNA 作为阳性对照。本试剂盒提供少量人基因组 DNA 溶液为阳性对照。在 N+2 个 PCR 管中按下表设置 PCR 反应:
成分N 个样品管NC 管PC 管
2×唾液直扩探针法 qPCR
MagicMix各 10 uL10 uL10 uL
自备引物对(10uM each)各 2 uL2 uL2 uL
自备探针(5uM)各 1 uL1 uL1 uL
N 个唾液样本各 1-7 uL--
人基因组 DNA 溶液--7 uL
补自备超纯水均到 20 uL到 20 uL到 20 uL
2.放入荧光 PCR 仪中进行扩增, 下表的扩增参数仅供参考。具体需要以使用的引物探针 Tm 和靶分子长度进行调节。一般选择三步法 PCR:
如果引物 Tm 值接近 60℃,也可以选择两步法 PCR:
3.数据处理
一般情况下,阴性对照 Ct 大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct 值应该小于或等于 30。对待测样品,如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性,如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间,则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则为阴性,如果小于 40,则为阳性。本试剂盒提供的阳性对照。
选择我们的2×唾液直扩探针法 qPCR MasterMix,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!