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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1893 |
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规格 | 20次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | Bacterial Flagellin Protein Purification Kit | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 1年 |
产品简介:
细菌鞭毛蛋白可以作为疫苗佐剂,具有重要的应用价值。传统的纯化细菌鞭毛蛋白的 方法多需要使用超速离心或者层析交换,步骤非常繁琐,使用不便,为此本公司开发了不 需要超速离心和层析交换的细菌鞭毛蛋白快速纯化试剂盒。
产品特点:
1.只有洗涤和沉淀两步,简单快捷。
2.所得细菌鞭毛蛋白纯度高,完整性好。
3.回收效率高,一般能得到相当于总蛋白量 6%的鞭毛蛋白。
4.可用于Escherichiacoli,Salmonellatyphimurium,Salmonellatyphi,
Citrobacterfreundii等细菌。
5.本产品需要冷冻高速离心机。
6.本产品足够 20 次细菌鞭毛蛋白纯化,每次可以处理 1 L 饱和菌液。
7.细菌鞭毛蛋白纯化试剂盒只能用于科研。
产品参数:
本产品由一个扁盒和一个大立盒组成,大立盒包装,常温运输和保存
成分规格包装
10×细菌鞭毛蛋白纯化洗涤液250 mL250 mL 本色瓶
使用手册1 份1 份
本产品由一个扁盒和一个大立盒组成,大扁盒包装,常温运输和保存
成分规格包装
细菌鞭毛蛋白纯化沉淀剂250 g×2500 mL 干粉瓶
使用手册1 份1 份
运输及保存
常温运输和保存,有效期一年。
自备试剂
超纯水、PBS 缓冲液(pH 7.4),透析耗材。
使用方法:
1.实验前取将适量的10×细菌鞭毛蛋白洗涤液用自备的超纯水稀释10 倍后得到1×细菌鞭毛蛋白洗涤液,放冰上待用。
2.收集 1 L 过夜培养的细菌饱和培养液(OD600 在 0.6 左右即可),5,000×g 室温离心 10 分钟后弃上清。
3.在细菌沉淀中加入 200 mL 自备的 PBS 缓冲液(pH 7.4),充分混匀得到细菌重悬液。
4.5,000×g 室温离心 10 分钟,小心弃除上清。
5.重复 3-4 步一次。
6.在细菌沉淀中加入 50 mL 1×细菌鞭毛蛋白洗涤液,充分混匀得到细菌重悬液。
7.将细菌悬浮液转移到 100 mL 烧杯中(或 100 mL 平底塑料平中)并放入磁力搅拌子,再将 100 mL 烧杯放到一个大烧杯(如 2 L 烧杯)中间,周边入碎冰固定小烧杯,然后将装有小烧杯的大烧杯放在磁力搅拌器上搅拌 30 分钟。
8.取出搅拌子,将细菌重悬液转移到离心管中,10,000×g 离心 20 分钟,小心收集含有细菌鞭毛蛋白的上清液。
9.将上清液转移到一个 100 mL 干净烧杯中并放入磁力搅拌子,再将 100 mL 烧杯放到一个大烧杯(如 2 L 烧杯)中间,周边入碎冰固定小烧杯,然后将装有小烧杯的大烧杯放在磁力搅拌器上缓慢搅拌。搅拌中加入细菌鞭毛蛋白纯化沉淀剂 23.6 g,待沉淀剂溶解后停止搅拌,静置 45 分钟。期间细菌鞭毛蛋白将形成沉淀。
10.取出搅拌子,将溶液转移到干净离心管中,4℃下 10,000×g 离心 10 分钟。
11.小心弃除上清,所得沉淀为细菌鞭毛蛋白。
12.由于所得细菌鞭毛蛋白含盐,所以用户需要采用过柱除盐法或透析除盐法除盐。由于 细菌鞭毛蛋白分子量在 15-40 Kd,所以需要据此选择合适截留孔径的透析袋,在合适透析液(根据后续实验确定)中进行过夜透析。本试剂盒不含相关试剂。
选择我们的细菌鞭毛蛋白纯化试剂盒,就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!