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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1655 |
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规格 | 50次 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | 4×LAMP MasterMix | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
4×LAMP MasterMix 含有 LAMP 扩增所需的所有成分,可以用于 LAMP 等温扩增。LAMP 即 Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增),它利用 4 条模板专一的特异引物和具有链置换能力的 Bst DNA 聚合酶 2.0(8 U/μL),在等温条件下(65℃左右) 30-60 分钟完成 LAMP 扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于定性 PCR 技术,同时还不需要昂贵的仪器设备。目前已成功应用于生物的快速检测,广泛用于各个领域。
产品特点:
1.即开即用,含有红色电泳示踪剂,扩增后可以直接上样,不需要上样液。
2.4×浓度,提供更多的加样品的空间,可以增加检测机率。
3.高特异性,精心优化的配方,非特异扩增比自配的试剂更低。
4.高扩增效率,一般比PCR 灵敏一个数量级。
5.65℃左右等温扩增,不需要贵重仪器。
6.本试剂盒足够 50 次 20 μL 体系的 LAMP 扩增。
7.提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
8.4×LAMP MasterMix(电泳法)只能用于科研,不能用于临床。
产品参数:
产品规格
成分规格包装
4×LAMP MasterMix
(含电泳示踪剂,待加酶)200 μL0.5 mL 白盖管
Bst DNA 聚合酶 2.0(8 U/μL)50 μL0.5 mL 红盖管
阳性对照模板-引物混合物50 μL0.5 mL 蓝盖管
使用手册1 份无
保存和运输
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂
DNA 模板、LAMP 引物
使用方法:
1.制备模板DNA:用于选用合适的方法制备模板DNA。如果有N个样品,最好设置N+2个样品制备,多出的两个一个是样品制备阳性对照,一个是样品制备阴性对照。
2.配制5×LAMP引物混合液
先加超纯水将合成的HPLC级别的下列引物干粉稀释到下表所标注的母液 浓度,然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯水,最后得到1 mL的5×LAMP引物混合液,此混合液足够250次20 μL体系的 LAMP扩增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积异于1 mL,则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。
注:如果没有Loop引物,则用超纯水补足其体积。
3.在冰上融化4×LAMP MasterMix(待加酶),混匀,稍离心。第一次使用时, 请将50 μ L Bst DNA 聚合酶2.0(8 U/ μ L) 全部加入到4 × LAMP MasterMix中并轻柔混匀至少1分钟,然后再使用。如果有N个样品,则在 N+2个反应管中加入以下组份,多出的一管是LAMP扩增阳性对照(PC), 一管是LAMP扩增阴性对照(NC):
4.混匀,置于65℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温,必须加热盖。如果用金属浴或水浴保温,没有热盖,必须覆盖50 μL的自备石蜡油,否则保温期间反应体系的水分会蒸发,会严重影响反应效率。
5.扩增结束后取5-10 μL扩增产物直接上样(本产品含有红色电泳示踪剂,不需要再加上样液,红色示踪剂的泳动速度相当于50 bp的DNA)进行2-3% 的琼脂糖凝胶电泳,有LAMP扩增的样品将可见LAMP特征性DNA梯度电泳
6. 结果分析:如果本试剂盒提供的阳性对照-引物混合物能够扩增而阴性对照不能扩出,则实验有效。如果阳性对照-引物混合物没有扩增出条带,则试剂盒的问题,请跟厂家联系。如果阴性对照(水作为模板)有扩增出条带, 则说明LAMP样品或试剂有过去的扩增产物的污染,需要注意操作的规范 性,如果不能解决,可以重新设计LAMP引物扩增新的靶片段。
选择我们的4×LAMP MasterMix(电泳法),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!