4×LAMP MasterMix（荧光染料法）在荧光定量 PCR 一起上进行扩增时，可以实时跟踪扩增过程，但不宜用于定量（这是 LAMP 技术决定的）。

产品简介：

4×LAMP MasterMix（荧光染料法）含有荧光染料法 LAMP 扩增所需的所有成分，可以用于荧光染料实时 LAMP 等温扩增。LAMP 即 Loop-Mediated Isothermal Amplification（环介导等温扩增），它利用 4 条模板专一的特异引物和具有链置换能力的 Bst DNA 聚合酶，在等温条件下(65℃左右) 30－60 分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于定性PCR 技术，同时还不需要昂贵的仪器设备。目前已成功应用于生物的快速检测， 广泛用于各个领域。

产品特点：

1.即开即用，含有本公司开发的 LAMP 专用荧光荧光染料，比常规的 SYBR 更好，不会产生抑制。

2.在荧光定量 PCR 一起上进行扩增时，可以实时跟踪扩增过程，但不宜用于定量（这是 LAMP 技术决定的）。

3.高特异性，精心优化的配方，非特异扩增比自配的试剂更低。

4.高灵敏度，一般比 PCR 灵敏一个数量级（取决于引物的筛选）。

5.4×MasterMix，最多可加入 14uL 模板，降低漏检率。

6.本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的 LAMP 扩增。

7.提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。

8.本产品只能用于科研，不能用于临床。

产品参数：

产品规格

成份规格包装

4×LAMP MasterMix

（含荧光染料，待加酶）200uL0.5mL 绿盖管

Bst DNA 聚合酶 2.050uL0.5mL 红盖管

LAMP 阳性对照

模板-引物混合物50uL0.5mL 黄盖管

使用手册1 份无

保存和运输

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂

LAMP 模板、LAMP 引物

使用方法：

1.制备模板DNA：用于选用合适的方法制备模板DNA。如果有N个样品，最好设置N+2个样品制备，多出的两个一个是样品制备阳性对照，一个是样品制备阴性对照。

2.配制自备的20×LAMP引物混合液。

先加超纯水将合成的HPLC级别的下列引物干粉稀释到下表所标注的母液浓度，然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯水， 最后得到0.1mL的20×LAMP引物混合液，此混合液足够100次20uL体系的LAMP扩增。如果需要配制的20×LAMP引物混合液体积异于0.1mL，则各成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。

注：如果没有Loop引物，则用水替代。

3.在冰上融化4×LAMP MasterMix（含荧光染料，待加酶），混匀，稍离心。第一次使用时， 请将50uL Bst DNA聚合酶2.0 全部加入到4 ×LAMP MasterMix中轻柔混匀，然后再使用。如果有N个样品，则在N+2个反应管中加入以下组份，多出的一管是LAMP扩增阳性对照（PC），一管是LAMP 扩增阴性对照（NC）：

4.混匀，置于荧光定量PCR仪器中65℃保温60分钟，每分钟采集一次SYBR 通道的荧光信号。如果荧光定量PCR仪不能设置恒温扩增参数，可以把变性复性和扩增三个温度都设置为65℃，三个步骤的总时间为1分钟即可，共60 个循环，在任何一步采集荧光信号即可。

5.结果分析：实验有效性判定。如果两个阳性对照能够得到标准的S型扩增曲线而两个阴性对照都没有扩增，则实验有效，才有必要对样品进行分析。如果阳性对照没有出现S型扩增曲线，则说明试剂盒可能失效，实验无效。如果阴性对照有S型扩增曲线，则说明LAMP引物设计得不好，有非特异扩增， 需要重新优化引物。也可能是环境或试剂有污染，实验无效。遇到实验无效的情况，请跟厂家客户联系，分析原因后再恢复实验。

6. 如果实验有效，则分析样品。凡是有S扩增曲线的，可以判断为阳性。凡是没有S扩增曲线的，可以判断为阴性。典型的荧光检测结果见下图。左边为阳性结果，扩增曲线为S型，右边为阴性结果，扩增曲线不呈S型。

选择我们的4×LAMP MasterMix（荧光染料法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！