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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1677 |
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规格 | 1mL | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | Single Cell Lysis Buffer(For RNA) | 保存条件 | -20℃ |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
单细胞裂解液(RNA 专用)是单细胞 RNA 提取专用裂解液,产品经过多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的 破坏,维持核酸的稳定性。单细胞裂解物可以直接用于测序和 RT-PCR 等试验。
本产品足够使用 200 次以上,一次可以处理 1-1000 个细胞。
产品参数:
产品规格
1mL
保存和运输
低温运输,﹣20℃保存,有效期一年。
自备试剂
PBS 溶液
使用方法:
如何制备单个细胞取决于实验样品和实验者所拥有的仪器设备,此处所列步 骤仅针对培养细胞、实体组织、淋巴细胞和卵裂球(2-8 细胞胚胎)等材料,对其他材料(如干细胞克隆、胚囊、胚胎组织等),用户需自行选用合适的方法制备单细胞。对已经处于单细胞悬浮状态的细胞(如 FACS 分离细胞、卵细胞等)则可以跳过制备过程而直接进入单细胞裂解步骤。
按下面手册,本产品 1 次可以处理 1-1000 个细胞。下面的步骤是以制备单个细胞/裂解反应为例,如果要制备 N 个细胞/裂解反应的悬浮液,浓度需要相应调整。
一、用培养细胞或实体组织制备单细胞
1.按常规胰-酶方法处理培养细胞或组织(一般是用 PBS 洗涤两次,再用 0.25 % Trypsin-EDTA 处理 2 分钟),将细胞重悬于自备的液体细胞培养基中。
2.按常规方法对细胞进行计数。
3.转移 100-4000 个细胞到新离心管中,400×g 离心 4 分钟沉淀细胞,小心弃上清(培养基)。
4.将细胞沉淀重悬于 50 μL 自备的 PBS 溶液中,使其终浓度为 2-80 个细胞 / μL。
5.在干净的培养皿上点加数个含 5 μL PBS 溶液的小液滴,也可以在 96 孔板或
0.2 mL PCR 管中进行。
6. 在第一个小液滴中加入 5 μL 细胞悬浮液,然后再从第一个小液滴中转移 5 μL 到第二个小液滴,如此系列稀释样品数次,使得其浓度接近每 2.5 μL 液体中含 1 个细胞,放冰上待用。二、用单细胞裂解液裂解细胞
7.在显微镜下用显微注射仪取 2.5 μL 样品,确认含一个细胞后,将其转移到一
个含 2.5 μL 本产品的 PCR 管中。最好同时设置无样品的阴性对照(2.5 μL样品中不含细胞)。
8.细胞将在 5 分钟内裂解。
9.裂解液可以立即用于后续实验(如 PCR 或 RT-PCR),也可以放冰上数小时待用。如果长期不用,需要放-80℃保存。使用时从-80℃中取出后,放冰上融化后即可使用。
选择我们的单细胞裂解液(RNA 专用),就是选择精准、高效、可靠的检测方案,为您的科研实验保驾护航!