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品牌 | 烜雅生物 | 货号 | XY-D-1678 |
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规格 | 10ml | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 科研 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
英文名称 | DNAgreen(Visible Light) | 保存条件 | 常温 |
有效期 | 12个月 |
产品简介:
本产品是国-内-首-款可见光核酸染料,用于电泳时替代 EB,在可见光下观察DNA 或 RNA 的电泳。
产品特点:
1.无毒。对人体和环境没有任何毒害,有利于保护使用者的健康和保护日益恶化的环境。
2.实时染色。可以在电泳过程中实时观察 DNA 和 RNA 的泳动,不需要任何额外的仪器设备或光源。
3.由于避免了 UV 对 DNA 的伤害,胶回收片段的克隆效率比 UV 下回收的片段高 2-10 倍,非常适用于 PCR 或酶切回收。
4.稳定。对光、水和热的稳定性很好,可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。
5.灵敏。检测灵敏度比 EB 低一倍,能满足常规核酸电泳实验要求。
6. 跟各种常用的核酸电泳缓冲液(如超快核酸电泳液、TBE、TAE)兼容。
产品参数:
产品规格
成分规格包装
核酸电泳染料(可见光型)10 mL10 mL 棕色瓶
使用手册1 份无
保存和运输
常温运输和保存(长期保存最好放 4℃),保存期限一年。
自备试剂
电泳相关缓冲液和凝胶。
使用方法:
电泳中染色(琼脂糖电泳时使用)
1.在 100 mL 融化的琼脂糖凝胶加入 100 L 本产品,充分混合均匀后倒胶, 凝固后凝胶将呈淡紫色。本产品不能跟其他任何核酸染料同时使用(如 EB 和 SYBR Green I),否则会相互干扰,不会出现任何条带。使用时请严格按照此比例加入染料,否则将出现糊带现象。
2.将凝固的琼脂糖凝胶放在TEB 或 TAE 中。为节约染料,不推荐将染料加到电泳缓冲液中。
3.将 DNA 样品与 DNA 上样液混合后上样,由于本染料比 EB 灵敏度稍低, 所以 DNA 的上样量和 DNA Marker 的上样量最好比使用 EB 染料时多 1
倍。注意:不推荐使用常规的含溴酚蓝和二甲苯蓝的上样液,因为这些染
料的颜色跟 DNA 和 RNA 的颜色都将呈蓝色,将严重干扰条带的观察和解读。
4.电泳,电泳参数同常规的电泳。跑在前面的是红色的电泳示踪染料(来于上样液),其泳动速度相当于 50 bp 的 DNA。
5.直接在光线明亮的位置直接观察电泳的进行,DNA 和 RNA 将呈现蓝色条带。如果有观察X 光片用的白色灯箱,可以将电泳中的电泳槽或电泳后的凝胶平放在铺有塑料布的白色灯箱发光面的上面观察效果更佳。典型电泳结果如下:
6.如果要回收 DNA,则关闭电泳后直接切下所需条带,其余回收过程同常规方法。
疑难解答
使用方法之二:电泳后染色(PAGE 胶染色必须使用电泳后染色法,琼脂糖电泳也可以选择本方法。不论是PAGE 胶还是琼脂糖胶,本方法所需染料的用量比电泳中染色大 2-10 倍)
7.按照常规方法进行PAGE 电泳或琼脂糖电泳。
8.用电泳液将本产品稀释 100-500 倍(100 mL 水需要加 0.2-1 mL 本产品),将胶放入,室温下摇晃染色 1-10 分钟即可看见蓝紫色的 DNA 和RNA 条带。具体染色多长时间取决于 DNA 和 RNA 的浓度。
9.染色液可以避光放 4℃保存,能反复使用数次。Q:为何电泳的前沿出现下图这种只出现一条带的情况呢?
A: 这是由于样品中有大量 RNA 小片段污染(基因组 DNA 提取时没有 RNase 处理的话常常会有大量 RNA 污染),这些小片段裹走了凝胶中的染料,使其后面的凝胶区域没有染料,因此后面的大片段没法染色。建议电泳后再染色观察大片段。
Q: 本产品可否用于RNA 染色?
A:可以,也呈蓝紫色条带。
Q:本产品是否可以加入上样液中进行染色?
A:不行,本产品只能直接加入琼脂糖凝胶中进行染色或PAGE 电泳后再染色。
Q:为何电泳时间长的话前端的 DNA 和 RNA 条带很淡或根本看不见?
A:跟 EB 一样,电泳时本产品朝负极方向移动,当前端的 DNA(最小片段) 进入没有染料的区域时,已经跟 DNA 或 RNA 结合的染料分子会逐渐脱落, 所以条带会变淡或看不见。解决办法之一是缩短电泳时间或电泳后再染色。
Q:本产品在哪种缓冲液中效果-最好?
A:本产品跟各种电泳缓冲液兼容,但背景最浅的是中超快核酸电泳液。
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