细菌DNA纯化试剂盒（过柱法）安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。

产品简介：

本产品可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组 DNA 的快速提取。

产品特点：

1.操作简单，整个过程不到 20 分钟。

2.产率一般在 5-20 μg/mL 过液培养的饱和菌液（108-109 个细胞）。

3.OD260/280 一般在 1.8 以上，可直接用于 PCR、酶切、杂交等实验。

4.DNA 片段长度一般在 40-50 kb 左右。

5.每次提取可以处理 0.1-1.5 mL 的细菌，也可以使用菌落。

6.价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。

7.安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。

8.细菌DNA纯化试剂盒（过柱法）只能用于科研。

产品参数：

成 份 规格包装材料

溶菌-酶干粉 600 mg1.5 mL 白色管

细菌 DNA 纯化溶液A15 mL15 mL 本色瓶

细菌 DNA 纯化溶液 B 7.5 mL10 mL 本色瓶

细菌 DNA 纯化溶液 C 30 mL30 mL 本色瓶

离心吸附柱 50 套塑料袋

通用洗柱液 50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脱液（基因组纯化专用） 10 mL10 mL 本色瓶

使用手册 1 份1 份

运输及保存

常温运输及保存（溶菌-酶干粉可以常温运输，但长期保存需要放 4℃或-20℃），有效期一年。

自备试剂

氯仿、自备无菌水。

使用方法：

注意：细菌 DNA 纯化溶液 A 和细菌 DNA 纯化溶液 B 容易产生沉淀，细菌 DNA 纯化溶液B 十分粘稠，均需要放置在 65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。一: 对革氏阴性细菌样品，不需用溶菌-酶

1.将 0.1-1.5 mL 过夜培养的菌液转移到 1.5 mL 塑料离心管中，12,000 ×g 室温离心1 分钟沉淀细菌，弃上清。

2.加入 300 μL 预热的溶细菌 DNA 纯化液A 到细菌沉淀中，充分吹打均匀。

3.再加入 150 μL 预热的细菌 DNA 纯化溶液 B 到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液 B 比较粘稠，可以采取称量方法取用，150 μL 约等于 150-160 mg。也可以将 1 mL 枪头剪去一截再吸取。

4.65℃放置 3-5 分钟。如果室温放置，DNA 产量会降低 10-20%。

5.加入 200 μL 自备氯仿，震荡混匀 10-30 秒，此时溶液将呈乳白色。

6.12,000 ×g 室温离心 2 分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的 1.5 mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。

7.加入 1.5 倍体积(约 0. 7 mL)的细菌 DNA 纯化溶液 C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少 2 分钟。

8.12,000 ×g 室温离心 1 分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。

9.将 0.5 mL 通用洗柱液加入离心柱中，12,000 ×g 室温离心 1 分钟，弃穿透液。

10.重复上步操作一次。

11.空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的 1.5 mL 离心管中。

12.加 50-100 μL DNA 洗脱液（基因组纯化专用），室温放置 3-5 分钟。

13.12,000 ×g 室温离心 1 分钟即得 DNA 溶液。

14.由于本产品使用的离心吸附柱吸附 DNA 的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的 DNA。

15.直接取 5-10 μL 电泳检测DNA，其余放冰箱备用。二: 对革氏阳性细菌样品，需用溶菌-酶

1.将 0.1-1.5 mL 过夜培养的革氏阳性细菌 12,000 ×g 室温离心 1 分钟后, 重悬于 0.6

mL 溶菌液中（溶菌液配制:30 mL 无菌水+600 mg 溶菌-酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀 5-10 次后放 37℃保温至少 30 分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，需要自己根据不同的细菌摸索)。

2.12,000 ×g 室温离心 10 分钟，小心弃上清。

3.后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第 2 步。

三: 其他注意事项

1.可以直接使用细菌菌落提取 DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到细菌 DNA 纯化溶液A 中，后续操作同上。

2.从单个菌落中提取到的 DNA 较少，所以只用 30 μL DNA 洗脱液（基因组纯化专用）洗脱。

选择我们的细菌DNA纯化试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！