土壤 DNA 纯化试剂盒（过柱法）产量高，每克土壤一般可以提取到 5-50 µg DNA，片段长度在 20-50 Kb， OD260/280 一般都在 1.8 以上。

产品简介：

本产品是专门用于从各种土壤样品和河海沉积物中提取高质量的DNA 的试剂。

产品特点：

1.去污染效果好，得到的 DNA 可以直接作为PCR 模板或酶切，不需要再进行去腐殖酸处理。

2.操作过程简单快速，整个操作只需要 10 多分钟，扩容性好。

3.产量高，每克土壤一般可以提取到 5-50 µg DNA，片段长度在 20-50 Kb， OD260/280 一般都在 1.8 以上。

4.适合于各种土壤（包括河海沉积物）。

5.土壤 DNA 纯化试剂盒（过柱法）足够 50 次土壤 DNA 微量提取。

产品参数：

成份规格包装

土壤 DNA 纯化溶液A25 mL30 mL 本色瓶

土壤 DNA 纯化溶液 B25 mL30 mL 本色瓶

专用上柱液40 mL60 mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脱液（基因组纯化专用）10 mL10 mL 本色瓶

使用手册1 份无

运输及保存

常温运输及保存，保存期为一年。

自备试剂

氯仿。

使用方法：

1.65℃预热土壤 DNA 纯化溶液 A，待其沉淀溶化后充分颠倒混匀。取 0.5 mL

加入到 1.5 mL 塑料离心管中并放置于 65℃待用。

2.称取 0.1-0.3 g 的土壤，加入到装有预热的土壤 DNA 纯化溶液 A 的离心管中。

3.震荡器上剧烈震荡 5-10 分钟。如果是扩量操作，可以使用更多土壤和较大离心管。也可以将同一种土壤在较大离心管中震荡处理，然后再分到 1.5 mL 离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的土壤震荡起来。

4.将离心管置于 65℃水浴中保温至少 5 分钟。

5.14000 g 室温离心 3 分钟，将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际颜色取决于腐殖酸的含量，上清液的体积一般为 300-400 µL)。

6.在上清液中加入等体积的土壤 DNA 纯化溶液 B，上下颠倒 30 秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。

7.将离心管冰浴至少 5 分钟。

8.14000 g 室温离心 3 分钟，转移上清到新的 1.5 mL 离心管中，上清液颜色将比第 4 步得到的上清的颜色稍淡，体积在 0.7 mL 左右。

注意：下面第 8-第 9 步的氯仿抽提操作可以省略，直接进入第 10 步，但 DNA 的

产量会低 50%左右，OD260/280 在 1.7-1.8。如果省略第 8-9 步直接进入第 10

步，则转移的溶液体积不要超过 0.6 mL，否则没有空间加专用上柱液。

9.加入 0.2 mL 的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡 30 秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。

10.14000 g 室温离心 3 分钟，小心转移上清到新离心管中。说明：离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。上清的颜色取决于土壤中腐殖酸的含量。将上清转移到新的 1.5 mL 离心管时，不要超过

0.6 mL，否则没有空间加专用上柱液。如果有多余的可以弃之不用。

11.加入 1.5 倍体积的专用上柱液，上下颠倒 30 秒混匀。

12.分两次上柱（即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液）。

13.加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。

14.再加 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，14000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的 DNA 的纯度稍有提高。

15.14000 g 室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染

DNA。

16.将离心吸附柱转移到一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 50 uL DNA 洗脱液

（基因组纯化专用）。

17.室温放置离心吸附柱 1-2 分钟。

18.14000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为提取到的 DNA 样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

选择我们的土壤 DNA 纯化试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！